细胞内DNA复制的引物与PCR引物有何区别？4

发布网友发布时间：2023-09-28 01:37

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热心网友时间：2024-12-15 04:19

细胞内DNA复制的引物与PCR引物有何区别
【相同点】：
　　1. 都以DNA为模板
　　2. 都以四种dNTP为底物
　　3. 都要DNA聚合酶
　　4．都需要Mg2+
　　5. 都需要解开双链为2条单链
　　6. 都沿着5‘-3’方向聚合
【不同点】：
　　1. PCR是DNA复制的体外扩增技术
　　2. 体内DNA复制半不连续复制，体外PCR连续复制，不产生冈崎片段。
　　3. 体内DNA复制是8种酶和蛋白共同参与（dnaB，引物酶，rep蛋白，SSB蛋白，DNA旋转酶，DNA聚合酶3，DNA聚合酶1，连接酶），体内DNA复制的聚合酶在高温时会变性，PCR需要耐热的DNA聚合酶（常用TaqDNA聚合酶）。
　　4. 生物体内DNA复制需要生物体自身的复制，PCR需要经过高温变性，低温退火和中温延伸过程，要经历三十次循环使特定DN*段放大数百万倍。
　　5. DNA复制需要校对以保证忠实性，PCR不需要校对。
　　6. 引物不同：体内DNA复制需要RNA，而且体内引物要除去，PCR需要两个人工合成的DNA引物，不需要切除。
　　7. PCR对DNA模板要求不高，纯度要求不严格，用量很低，但是引物的设计十分重要，决定了PCR扩增片段的大小和特异性。