发布网友 发布时间:2023-10-18 04:41
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热心网友 时间:2024-12-01 01:49
有机溶剂沉淀蛋白质原理介绍如下:
有机溶剂引起蛋白质沉淀的主要原因是加入有机溶剂使水溶液的介电常数降低,因而增加了两个相反电荷基团之间的吸引力,促进了蛋白质分子的聚集和沉淀。
有机溶剂引起蛋白质沉淀的另一种解释认为与盐析相似,有机溶剂与蛋白质争夺水化水,致使蛋白质脱除水化膜,而易于聚集形成沉淀。
扩展资料:
向溶液中加入有机溶剂能降低溶液的介电常数,减小溶剂的极性,从而削弱了激御溶剂分子与蛋白质分子间的相互作用力,导致蛋白质溶解度降低而沉淀,破坏水化膜。
由于使用的有机溶剂与拦铅数水互溶,它们在溶解于水的同时从蛋白质分子周围的水化层中夺走了水分子,破坏了蛋白质分子的水膜,因而发生沉淀作用。
有机溶剂沉淀法的优点是:分辨能力比盐析法高,即一种蛋白质或其他溶质只在一个比较窄的有机溶剂浓度范围内沉淀。
沉淀不用脱盐,过滤比较容易,因而在生化制备中有广泛简首的应用。溶剂容易分离,并可回收使用。
蛋白质沉淀作用、类别、特点及原理都是什么?
1、盐析:向蛋白质溶液中加入高浓度中性盐破坏胶体的稳定性庆誉毁,中和蛋白质所带的电荷,又可以破坏誉备水化膜。此法沉淀蛋白质一般不变性,可通过透析出去中性盐,仍保持生物学活性。
2、有机溶剂:利用它们的强亲水性破坏水化膜,由于它们不能中和蛋白质所带电荷,需要在pI附近沉淀蛋白质。低温条件下,变性发生缓慢,可用来制备血浆蛋白质。常温下会变性。
3、重金属盐:带负电荷的蛋白质与带正电荷的重金属离子结合形成不溶性盐而沉淀。用时,需调节pH,使其大于pI,一般会发生变性。
4、生物碱试剂与某些酸类:带正电荷的蛋白质可与生物碱试剂(如苦味酸、鞣酸、钨酸)或某些酸(如三氯醋酸、*、过氯酸)的酸根隔阂形成盐而沉淀。一般发生变性。临床用于血液化学分析,常用此法除去血液中的蛋白质虚核。