为什么pcr扩增得到的目的基因不能直接用于连接反应

发布网友发布时间：2022-04-24 18:37

共4个回答

热心网友时间：2023-11-02 09:33

不同的反应是在不同的缓冲反应体系下进行，所以分子实验的一个原则是，在进行下步实验时，要经可能将上步实验中残留的缓冲体系去除干净，否则残留的缓冲体系将会影响后续反应体系的缓冲能力，干扰后续实验。补充一下。是否产物为粘性末端和平末端并不重要，因为对于两种产物都有不同的载体进行连接。

热心网友时间：2023-11-02 09:33

因为有很多杂带不纯，需要先纯化连接T载体测序，还有就是PCR之后两头都带有a碱基，这就是为社么能直接连接T载体的原因，

热心网友时间：2023-11-02 09:34

谁说不可以？我一直嫌回收纯化目的条带麻烦，所以我一直用PCR产物连接T载体，没问题

热心网友时间：2023-11-02 09:34

因为PCR产物不一定带有连接需要的粘性末端~~~