磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取过程

发布网友发布时间：2022-04-24 23:59

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热心网友时间：2023-10-15 21:56

磁珠法核酸提取过程：

1、裂解

取抗凝全血到1.5mLEP管中，加入BufferA、BufferB，混合均匀。然后把EP管置于恒温水箱中温育15～20min。

2、结合
将EP管从温育设备中取出，离心后取上清，加入振荡混匀的磁珠结合液，颠倒混匀。将EP管置于磁力架上进行磁分离，弃废液（吸净管盖及管底残液）。

3、洗涤
⑴ 加入洗涤液Ⅰ，点振数次（若有团状或丝状物可增加点振次数及力度），然后磁分离，吸净管盖及管底的残液；
⑵ 加入洗涤液Ⅱ，点振数次（若有团状或丝状物可增加点振次数及力度），然后磁分离，吸净管盖及管底的残液；
⑶ 重复步骤⑵一次；
⑷ 室温下开盖干燥。

4、洗脱
加入洗脱液，放置水浴锅中温育后磁分离，小心吸取上清液至新的EP管中，进行下游实验。

热心网友时间：2023-10-15 21:57

取10-20mg左右的组织，用液氮研磨为粉末，转入1.5mL 离心管内，加入100 μL 生理盐水，振荡15秒（或直接在100 μL 生理盐水中将组织匀浆为细胞悬液），加入200 μL 裂解液， 20 μL biog复合消化液，充分混匀，56℃温育12分钟（如组织匀浆不充分，可适当延长消化时间至组织完全消化）。
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冷却到室温，加入300μL异丙醇，充分混匀，再加入20μL磁珠复合液（每次使用前须充分混匀），振荡混匀3min（注意不要颠倒混匀，以防磁珠粘附于管盖内壁），静置2min。
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将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附，开盖，彻底吸弃上清液（注意*头不要接触磁珠）。
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加入800μL配制后的洗涤液，将离心管从磁力架上取下，充分振荡2min，确保磁珠完全分散。将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附，开盖，彻底吸弃上清液（注意*头不要接触磁珠）。
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将离心管从磁力架上取下，开盖，干燥约3-5min，至无明显乙醇气味。
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加入50-100 μL洗脱液，振荡至磁珠充分散开，室温静置2min，再振荡混匀1min。
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将离心管置于磁力架上，待磁珠完全吸附后，小心吸取上清液至一新的1.5mL离心管中，提取的核酸可直接用于下游实验，或-20℃保存备用。

热心网友时间：2023-10-15 21:57

BIOG磁珠法核酸提取试剂盒可用于血液、组织匀浆液、细胞悬液、拭子涮洗液、血浆、血清、乳液、腹水、尿液等样本中DNA或RNA的提取纯化，可手工采用磁力架操作，也可配套自动化提取仪使用。操作简便快速，只需20多分钟即可完成全部提取操作。

热心网友时间：2023-10-15 21:58

磁珠法核酸提取一般可以分为四步：裂解——结合——洗涤——洗脱。