发布网友 发布时间:2022-04-24 10:08
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热心网友 时间:2023-10-09 21:03
1、固定相不同:正相硅胶具有极性基的表面,而反相硅胶是经过改性,表面键合烷基链(例如 C-18),极性更小,因此对极性化合物有较小的保留。
2、适用的样品类型不同:由于反相条件下,修饰了硅胶表面的羟基,使其极性降低,使得其适用性变得更加宽广(相对比反相而言),各类极性的大小分子,天然产物,都可以在反相体系中得到有效分离。
3、流动相不同:正相色谱,因为硅胶表面的硅羟基极性大,极性大的水溶性化合物很难被洗脱下来,只有使用更强极性的溶剂才能成功。在反相色谱中,因为极性化合物和固定相的吸附性较小,因此用较小极性的溶剂,就可以实现比较理想的洗脱效果。
扩展资料:
注意事项:
避免压力和温度的急剧变化:温度突变或使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况,柱压突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。
勿直接改变溶剂组成:改变溶剂的组成时,应逐渐缓慢改变,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。
禁止反冲:一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
参考资料来源:百度百科-正相色谱
参考资料来源:百度百科- 反相色谱