植物基因工程的内容(基因克隆方法、连接、转化、筛选及鉴定)
发布网友
发布时间:2022-04-24 05:38
我来回答
共4个回答
热心网友
时间:2023-11-01 14:14
1)目的基因制备和分离:一般通过文库筛选、同源序列比对等方法进行克隆。
2)DNA重组载体的构建:选择植物表达载体,根据载体选择或添加酶切位点,然后进行酶切连接,构建重组载体。
3)转化:转化方法有多种:农杆菌法:将重组载体用电击或热激的方法将其转入农杆菌中,再用农杆菌侵染植物;基因*法:将重组载体与金粉混合后用基因*轰击组织块;此外还有其他一些方法。
4)植物阳性植株的筛选和鉴定:一般先用抗性初次筛选后,在基因水平上用PCR扩增目的片段或做Southern杂交;在RNA水平上做半定量或Nouthern杂交.
5)基因表达产物的分离纯化和鉴定:这是蛋白水平上的鉴定,一般是提取纯化蛋白,做蛋白分析。
热心网友
时间:2023-11-01 14:14
1)目的基因制备和分离:一般通过文库筛选、同源序列比对等方法进行克隆。
2)DNA重组载体的构建:选择植物表达载体,根据载体选择或添加酶切位点,然后进行酶切连接,构建重组载体。
3)转化:转化方法有多种:农杆菌法:将重组载体用电击或热激的方法将其转入农杆菌中,再用农杆菌侵染植物;基因*法:将重组载体与金粉混合后用基因*轰击组织块;此外还有其他一些方法。
4)植物阳性植株的筛选和鉴定:一般先用抗性初次筛选后,在基因水平上用PCR扩增目的片段或做Southern杂交;在RNA水平上做半定量或Nouthern杂交.
5)基因表达产物的分离纯化和鉴定:这是蛋白水平上的鉴定,一般是提取纯化蛋白,做蛋白分析。
热心网友
时间:2023-11-01 14:14
基因工程的主要内容和步骤。
1)目的基因制备和分离(获得);
2)DNA重组体的构建(酶切、连接);
3)DNA重组体的扩增(导入);
4)重组体筛选和鉴定(筛选);5)基因表达及产物的分离纯化和鉴定(表达)。
热心网友
时间:2023-11-01 14:14
基因工程的主要内容和步骤。
1)目的基因制备和分离(获得);
2)DNA重组体的构建(酶切、连接);
3)DNA重组体的扩增(导入);
4)重组体筛选和鉴定(筛选);5)基因表达及产物的分离纯化和鉴定(表达)。
热心网友
时间:2023-11-01 14:15
忘差不多了,克隆就是提取细胞核和其他植物的细胞质,基因工程就是截取一部分基因在酶的作用下使碱基对分开植入对应基因,筛选时用dna探针即可
热心网友
时间:2023-11-01 14:15
专业鉴定机构
热心网友
时间:2023-11-01 14:15
忘差不多了,克隆就是提取细胞核和其他植物的细胞质,基因工程就是截取一部分基因在酶的作用下使碱基对分开植入对应基因,筛选时用dna探针即可
热心网友
时间:2023-11-01 14:15
专业鉴定机构
植物基因工程的内容(基因克隆方法、连接、转化、筛选及鉴定)
1)目的基因制备和分离:一般通过文库筛选、同源序列比对等方法进行克隆。2)DNA重组载体的构建:选择植物表达载体,根据载体选择或添加酶切位点,然后进行酶切连接,构建重组载体。3)转化:转化方法有多种:农杆菌法:将重组载体用电击或热激的方法将其转入农杆菌中,再用农杆菌侵染植物;基因枪法:将...
简述基因工程的基本步骤,并举例说明如何利用基因工程技术生产一种源自细...
1. 目标基因获取:从细菌基因组中克隆IGF-1基因。2. 基因克隆:将IGF-1基因克隆到一个适合在大肠杆菌中表达的质粒载体中。3. 宿主细胞转化:将重组质粒转化到大肠杆菌中。4. 筛选鉴定:通过抗生素筛选,选出含有重组质粒的大肠杆菌克隆。5. 目标蛋白表达:诱导大肠杆菌表达IGF-1蛋白,可能需要优化培养...
基因工程包括哪些主要内容?
基因工程主要包括基因重组、基因组的改造、核酸序列分析、分子进化分析、分子免疫学、基因克隆、基因诊断和基因治疗等内容。基因工程是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、...
园艺植物基因工程图书目录
首先,第一章概述了基因工程的基本概念,从基因概念的产生和发展,到基因工程的定义和历史发展。接着,详细阐述了园艺植物基因工程的特色,以及其主要研究内容,如花卉、果树、蔬菜和药用植物的转基因研究。第二章深入到基因转化受体系统的建立,包括植物组织培养技术在花卉(如香石竹、兰花)、果树(如草莓...
基因工程包括哪些
基因工程包括的主要内容有:1. 基因克隆。这是基因工程的核心技术之一,通过特定的技术将DNA片段进行复制,使其在数量上得到大量扩增。这种技术主要依赖于聚合酶链式反应(PCR)等方法。2. 基因表达调控。此部分主要研究如何通过人工操作改变基因的表达水平,包括转录和翻译过程。通过调控启动子、增强子等元件...
高中生物选修三知识点总结
(3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。第三步:将目的基因导入受体细胞_1.转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2.常用的转化方法:将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是 农杆菌转化法,...
基因工程的步骤都包括哪些
基因工程的步骤包括目的基因的制备、目的基因与克隆载体的重组、重组体转入受体细胞、克隆子的筛选和鉴定。基因工程(geneticengineering)又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后...
基因工程的步骤,具体一点
基本的基因工程技术步骤简单来说五个字:切、接、转、增、检。“切”就是将加入酶切位点的外源基因和拥有相同酶切位点的载体进行限制性内切酶酶切反应,克隆质粒可以单酶切也可以双酶切,要是做表达质粒就需要双酶切以确定正确的基因表达方向;“接”就是将前面用内切酶处理后有着相同粘性末端的外源...
高中生物选修3知识点总结
方法:从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原-抗体杂交。四有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。1.3基因工程的应用一、植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。二、动物基因工程:提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物、作器官...
了解克隆工程,基因工程,器官移植,等生命信息。并作简要记录
克隆羊“多利”,以及其后各国科学家培育的各种克隆动物,采用的都是细胞核移植技术。所谓细胞核移植,是指将不同发育时期的胚胎或成体动物的细胞核,经显微手术和细胞融合方法移植到去核卵母细胞中,重新组成胚胎并使之发育成熟的过程。与胚胎分割技术不同,细胞核移植技术,特别是细胞核连续移植技术可以产生无限个遗传...