HPLC出峰顺序和TLC斑点Rf值大小有关系吗
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发布时间:2023-06-25 03:28
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热心网友
时间:2024-11-12 09:15
首先要确定A和B物质在紫外下的最大吸收分别是多少,其次是A和B的含量分别是多少。根据你的情况,可以大致分析出A物质在254nm下吸收强度远远大于B物质,而B物质的浓度远大于A物质。
在TLC下,A为微量物质,分辨精度不高,吸收几乎看不到,而B物质虽然吸收不大,单胜在浓度大,可以分辨。
在HPLC下,A物质在分离柱中被富集在一起,加上吸收大,出峰自然强,而B物质虽然浓度大,但吸收不强烈,因此出峰反而较弱。
建议做一下DAD,找一个矫正因子为1的波长来测HPLC。或者用示差折光检测器作分析可能比较省心。