psmart质粒用什么引物测序

psmart质粒用5＇测序引物pGEX5、3＇测序引物pGEX3。psmart质粒诱导方式是IPTG或乳糖及其类似物；5＇测序引物：pGEX5：GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG；3＇测序引物：pGEX3：CCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGG。可用GST亲和柱纯化重组蛋白。质粒宿主：大肠杆菌；哺乳细胞；酵母菌；噬菌体等；质粒用途：蛋白表达；基因编辑...

分别为：SMART cDNA Library Construction Kit（编号：634901）；Creator SMART cDNA Library Construction Kit（编号：634903）.两种文库构建试剂盒采用的技术原理是一样的,区别仅在于选用的文库载体不同：634901选用的是噬菌体载体λTripIEx2；634903采用的是质粒载体pDNR-LIB.两个方案可以采用一个是对于只有...

3.Clonetech的SMART方法是用PCR的方法合成第二链的,由于PCR的选择性抑制及竞争性扩增,这样就会造成基因冗余度非常高,低丰度的基因PCR扩增不到,会丢失掉,长片段的基因也会丢失掉,另外会造成重复序列非常多,特别是起始的RNA样本量少的情况(比如5ug RNA以下就需要进行15个循环以上的PCR扩增,大大降低文库质量),,大大...

操作方法是首先用内切酶酶切基因组DNA和载体质粒DNA,得到小片段DNA和线形字体序列,然后用T4连接酶把载体序列与DNA小片段相连接,以连接产物为模板,以一个基因特异引物和载体引物进行扩展,通过克隆测序得到未知的侧翼序列。 2.1.2连接单链接头的PCR 连接单链接头的PCR又叫锅柄PCR,是连接单链接头PCR的典型代表,因...

这里强调的是对载体的选择,常规用的是 λ 噬菌体,这是因为 λ DNA 两端具有由12个核苷酸的粘性末端,可用来构建柯斯质粒,这种质粒能容纳大片段的外源 DNA。1.2 cDNA 全长文库 经典 cDNA 文库的构建虽然高效、简便,但文库克隆的片段一般较小,单个克隆上的 DNA 片段太短,所能提供的基因信息很少,大多需要几个克隆...

棉酚(Gossypol)为锦葵科棉族(Gossypieae)植物特有,存在于色素腺体(pigment gland)中,是棉花自身重要的抗性物质,但由于棉酚对人类和单胃动物有毒,限制了丰富的棉籽蛋白及油脂资源的利用。为有效调控棉酚合成,极有必要对色素腺体形成的分子机制进行研究。 因此本文从以下几个方面进行相关研究: 首先选用川2802...

经典 cDNA 文库构建的基本原理是用 Oligo(dT) 作逆转录引物，或者用随机引物，给所合成的 cDNA 加上适当的连接接头，连接到适当的载体中获得文库。其基本步骤包括：RNA 的提取(例如异硫氰酸胍法，盐酸胍—有机溶剂法，热酚法等等，提取方法的选择主要根据不同的样品而定)，要构建一个高质量的 cDNA ...

分别为：SMART cDNA Library Construction Kit（编号：634901）；Creator SMART cDNA Library Construction Kit（编号：634903）.两种文库构建试剂盒采用的技术原理是一样的,区别仅在于选用的文库载体不同：634901选用的是噬菌体载体λTripIEx2；634903采用的是质粒载体pDNR-LIB.两个方案可以采用一个是对于只有...

最近 HUANG 等人即用 RACE 试剂盒克隆了一种含有类植物血凝素免疫受体 ITIM。 3.1.2 用 PCR 法从 cDNA 文库中快速克隆基因 通过对文库的筛选或适用简并引物进行 PCR 反应,常常只能获得不完整的 cDNA 片段。为了得到 cDNA 全长,常常要重新筛选文库。重新筛选文库工作量大,RACE 虽然为此提供可方便,但应用该方法...

最近 HUANG 等人即用 RACE 试剂盒克隆了一种含有类植物血凝素免疫受体 ITIM。 3.1.2 用 PCR 法从 cDNA 文库中快速克隆基因 通过对文库的筛选或适用简并引物进行 PCR 反应,常常只能获得不完整的 cDNA 片段。为了得到 cDNA 全长,常常要重新筛选文库。重新筛选文库工作量大,RACE 虽然为此提供可方便,但应用该方法...