MTT法中可以直接加DMSO吗?
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发布时间:2022-04-25 21:46
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热心网友
时间:2022-06-17 19:49
首先说,为什么要弃去含有MTT的培养基,因为培养基是水溶性的,而活细胞内琥珀脱氢酶与MTT反应生成的甲瓒是不溶水的,DMSO是脂溶性的,是为了甲瓒充分溶于DMSO,因此需要将含有MTT的培养基去除,否则会十分影响甲瓒在DMSO中的溶解性。
如果你不想弃去上清,那你可以不用MTT,而用WST-1。WST-1是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙*的formazan。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。WST-1是MTT的一种升级替代产品。
WST-1生成的橙*的formazan是溶于水的,因此可以不弃上清。千万别去掉哦,生成的甲瓒就在培养基里,不用加DMSO,直接上酶标仪检测就行了。
WST法简单,但是价格要比MTT贵。
参考网址on http://www.bio1000.com/zt/focus/dmso.html