发布网友 发布时间:2023-09-24 18:58
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小球藻生物量的快速测定技术研究 被引量:33
摘要选取540-700 nm中11个波长对不同密度的小球藻进行吸光值测定,同时对其进行精确计数和干重测定,结果表明:(1)在11个波长下,小球藻吸光值与细胞密度存在理想的线性关系,线性系数r〉0.999,其中以680 nm波长处最为灵敏,其次为540 nm;(2)小球藻吸光值与细胞干重之间同样存在良好的线性关系:Y(g/L)=0.25 X(OD680)-0.001 5,线性系数r〉0.999。表明光密度法能快速且准确地测定小球藻生物量。与传统的细胞计数法和叶绿素a测定法相比,光密度法更方便、快捷,能极大地提高实验效率和准确度。
小球藻是一类普生性单细胞绿藻,易培养、倍增速率快、温度耐受性强、油脂含量较高[1-2],具有非常高的利用价值。目前,其油脂可作为生物柴油的原料[3-5],同时还可提取其他多种有效成分,比如生长因子CGF(chlorella growth factor)。小球藻富含维生素,可作为生产维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6和维生素C等的来源[6]。它也是进行生物技术研究的材料,其多糖与蛋白质已被证明具有显著的抗肿瘤活性、抗原病菌以及抗病毒感染能力[7]
但小球藻具有坚韧的纤维素细胞壁[8],无论是提取油脂或是胞内蛋白等,都需要采用破碎方法将细胞壁破碎,而在破碎过程中需检测小球藻破碎率来表征破碎程度,因此,选择操作简便、测量精准的破碎率检测方法尤为重要。
光密度法是利用藻细胞在某一波长处的光吸收值来测定细胞密度的方法[9],同时超声波破碎后的藻液亦可用丙酮提取比色法来测定悬浊液中的叶绿素含量[10]。细胞计数法是定量分析中较为可靠的方法[11],但其操作过程较为繁琐,且若取量不均,或样品中的细胞浓度过低时,容易造成一定程度的误差