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发布网友 发布时间:2022-04-25 09:17

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热心网友 时间:2023-12-02 15:31

农业科学为支持农业体系的维持与发展的科学,研究范围包括农艺与园艺、农机及农工、植物保护、土壤农化及环境保育、森林与水土保持及生态、渔业科学、畜产学、兽医学等学科。

台湾现有农业经营生产体系所面临的主要课题有:生产导致的废弃物污染、水资源与土壤理化性状劣变、地层下陷、进入世界贸易组织后的强烈竞争压力、动植物疫病的监控、精致农业的发展,以及结合农学与医学的研究工作等。

主要研究机构包括台湾大学农学院、中兴大学农学院、海洋大学水产学院、屏东科技大学、农业试验所、林业试验所、水产试验所、畜产试验所、养猪科学研究所等,以及1997年“*”研究院成立的生物农业科学研究所筹备处。

研究人力方面,1998学年各大学校院农科专任教授413人、副教授362人、助理教授42人及讲师202人,共计1,019人,详见表2-5-1。

1998年参与农科专题研究计划的人力共1,440人次,执行594项计划,总经费达新台币438.99百万元,详见表2-5-2。

二、现况
(一)农艺与园艺学研究

1998年,补助农艺专题研究计划26件,经费新台币15.72百万元,领域涵盖作物生理、遗传育种、组织培养、分子生物、生物统计与试验设计;补助园艺专题计划31件,经费新台币18.44百万元,研究领域涵盖果树、蔬菜与花卉的生理与栽培、菌根、生物技术及景观与造园等。成果说明如下:

1. 作物生理

(1) 研究水稻抗氧化酵素活性与叶片老化间的关系,结果显示:a.水稻叶片内过氧化氢 (catalase)活性的变化与老化的控制无关;b.光线延缓水稻叶片老化与光线下超氧化物歧化 (superoxide dismutase)与抗坏血酸过氧化物 (ascorbate peroxidase)活性较高有关;c.甲基茉莉酸盐(methyl jasmonate)在黑暗下所促进的叶片老化,与超氧化物歧化 活性的降低有明显关系。

(2) 以正贮型水稻种子为材料,调查不同贮藏时间,种子贮藏品质的变化及蛋白质氧化程度。结果显示,一般贮藏6个月后的水稻种子,其发芽率下降,种子浸润渗漏量增加,种子可萃取的蛋白质含量亦随贮藏期改变,因分子将特性改变与转变,所以老化的水稻种子并没有累积大量的氧化蛋白质。

(3) 以SN-1及H236二品种的超甜玉米种子为材料,予以不同温度、不同时间萌爆处理后,结果显示,萌爆处理的确能提升超甜玉米种子的活力。此种子活力的提升,则可能与种子在萌爆处理期间,一些种子内可以清除自由基与过氧化物的保护机制获得刺激、提升有关。而自幼苗生长势的表现,也因萌爆处理而有提升与改善。

(4) 采用玉米台南19号砂耕栽培,于三叶期进行浸水10天处理,并且于浸水开始后0、1、3、5、8、10天分别取样分析。结果显示,玉米植株部位不同,对浸水的反应和伤害程度即表现不同。浸水诱导植株体内活性氧的代谢改变,导致脂质过氧化作用的产生,并且使得蛋白质降解。而抗过氧化防御系统受浸水的*,无法发挥其应有的作用,则是更加重脂质过氧化作用的伤害。

(5) 调查种子贮藏过程中蛋白质的氧化程度及蛋白质的活性变化,结果显示,毛豆种子随着贮藏期老化,可溶性蛋白质的氧化程度显著增加,同时,各种酵素活性亦显著降低。

2. 遗传育种

(1) 落花生种子耐湿性,受基因的累加性及显性作用的影响,且基因间的作用为超显性。种子耐湿性(发芽率)与各农艺性状间的相关系数,在亲本与杂交组合间,除剥实率呈极显著的正相关外,其余性状均呈显著或极显著的负相关。除发芽率外,亲本与杂交组合间,其平均值差异并不大,但标准机差在杂交组合间的差异较大。耐湿性强的品系种脐内部的结构较为紧密,且布满腊质物,而不耐湿性的品系种脐内部的结构则较为松散。

(2) 以大豆植株的全量DNA为材料,进行逢机增殖多型性DNA(random amplified polymorpholic,RAPD)分析,并藉由各收集系间的相似系数及分群分析的结果,探讨其种内的亲缘关系。结果发现,参试的38个台湾在来种大豆已有品种间分化的现象,主要的变异为少数品种所造成,依据结果将各品种整理后,可分为26个种原进行保存的工作。
(3) 利用单粒后裔育种法(single seed descent,SSD),于田间疏植增进蜀黍族群至F5世代,并于温室繁衍F4世代,而得不同SSD法密植淘汰的F5世代。于田间评估各世代族群的农艺性状,可知SSD法密植将会造成族群植株有差异的现象,而10×10cm2密植将可能为蜀黍SSD法最可行的条件。由各世代族群农艺性状的标准化变量的一般化样品变方角垟APD分子标志变异的夏农(Shannon's)指数(H0)可知,若在较正常的栽培环境下,RAPD技术将可应用于侦测族群遗传歧异度。

3. 组织培养

(1) 将台湾双锯齿叶玄参(Scrophularia Yoshimurae Yamazaki)的茎顶或茎 节培养于含有1~2 mg/l BA(benzylaminopurine)及0.2 mg/l NAA(α-naphthaleneacetic acid)的MS(Mu-rashige & Skoog)培养基,可诱导大量不定芽。不定芽的发根,则以全量MS固体培养基添加0.5 mg/l NAA或IBA(indole-butyric acid)最佳。

(2) 将当归引种台湾,进行大量繁殖及生产其二次代谢产物,可扩大省产生药资源。利用当归未熟胚可诱导愈合组织,并建立细胞悬浮培养,以分离萃取有效成分n-butylidene phthalide(BP)及ferulic acid(FA)。拟胚化悬浮细胞可诱导体胚形成,并分化成体胚苗及植株,达到大量繁殖的目的。

4. 分子生物

(1) 利用多重区间定位法探讨紧密连锁的基因,若具有不同方向的作用和在不同分子遗传标识间隔下,能成功地辨别出个别基因的能力和准确程度。结果显示,若连锁基因作用的方向不同,个别基因较易被分辨出。基因在区间内的相对位置亦对辨别能力有影响。样本数小时(n=100),若连锁基因被成功地分辨出,所估位置的标准差相当大。辨识能力随基因连锁紧密程度的增加而减弱。

(2) 利用比较遗传图谱构建法,以近源种的现有遗传图谱为指引,以保守的*片断长度多型(restriction fragment length polymophorism,RFLP)分子标记为优先筛检对象,配合狼尾草与珍珠粟杂交具孤雌生殖特征的分离族群,以缩短遗传图谱构建时间,同时提供孤雌生殖性状定位于遗传图谱上的机会。

5. 生物统计与试验设计

预测物质的生产对芋作物收获计划及制粉操作非常重要,在台湾省农业试验所进行两年共12个种植期的水田栽培槟榔心芋的周年栽培试验,加以统计分析及模式建立。结果得知,气温及日射量是影响水芋生长的重要气象因素。虽然水芋全生育期均处于营养生长状态,但由植株各部位干物质生产分配的趋势,亦可大致将其整个生长期划分成生长初期、地上部生长旺盛期、球茎快速膨大期及球茎成熟期4个阶段。不同种植月份间的水芋生长差异,主要决定于地上部生长旺盛期的持续时间长短及叶片生长速率。故本省中部地区以1~3月种植期为水芋最适栽培季节,而7~9月种植期较不利于栽种水芋。而在热单位模式下,估得水芋球茎发育的基础温度为18.3℃。利用生育度数法比生育日数法可更有效地建立水芋生长模式,其植株各部位干物重为移植后有效积温的二次指数函数,此可用以预估不同栽培季节下的水芋生育状况及产量预测。

6. 生理与栽培

(1) 对油桃早期胚培养研究显示,特早熟油桃的胚在果实软化时严重退化,最佳取胚时期在果实硬熟期。以MS培养基培养早熟和特早熟桃及油桃的胚获得74%的成苗率,较培养在NN(Nitsch & Nitsch)培养基13%及SH培养基的 10%为佳。添加生长调节物质与不添加任何生长调节物质的MS培养基所得结果,并无显著差异。未经低温处理的杂交胚,萌芽率低且芽体呈簇生状,无法发育成正常小苗。经4℃的低温处理的杂交胚,1~2个月后即陆续长出胚根,可发育成正当小苗,惟经健化处理后成活率仍低。

(2) 利用糖溶液进行莲雾果皮培养,探讨莲雾果皮花青素形成的机制。培养后,每天或每两天取样品分析莲雾果皮与培养液中总可溶性固形物、总游离氨基酸、蛋白质、总酚化合物、苯丙胺酸裂解 (phenylalanine ammonialyase,PAL)活性、花青素与叶绿素浓度。随着培养日数的增加,培养液中糖浓度逐渐降低(r2=0.96),而果皮中总可溶性固形物的浓度则逐渐增加(r2=0.88),显示培养液中的糖是被果皮所利用。总游离氨基酸浓度在培养初期增加,但后来随着培养日数增加而减少。可溶性蛋白质 (r2=0.86)与总酚类化合物的浓度 随着培养日数的增加而快速增加(r2=0.88)。PAL(合成花青素的重要酵素)的活性由田间采收到试验结束有增加的趋势(r2=0.77)。将莲雾果皮花青素与果皮各项品质与生理的特性的间作相关系数分析,结果显示,花青素读值与果皮总可溶性固形物、蛋白质、PAL活性与总酚类化合物的间大多有极显著或显著的正相关。因此,建议莲雾果皮花青素的生合成是经由碳水化合物的消耗,蛋白质、PAL活性与总酚类化合物浓度的增加而来。

(3) 台湾观赏性着生植物主要栽培地区多分布在台湾中南部的苗圃及兰园,其中又以高屏为集中地区,但其栽培技术多沿袭传统花卉栽培方式,并未针对其原生性状加以利用。对兰花、蕨类及观赏菠萝所作的基本生态生理的研究显示,其多肉性明显与其耐旱性相关。分析蝴蝶兰及数种商业栽培的蕨类与观赏菠萝的可滴定酸,均呈现景天酸代谢的特性。建议研究以景天酸特性为基础的栽培模式与贮运条件,以供业者参考应用。

7. 菌根研究

菊科花卉菌根生理的研究方面,大理花在高温下接种丛枝菌根菌,可提高10%的扦插存活率。大理花施用ABA 1ppm有促进块根形成的效果,施用5ppm以上ABA(abscissic acid)且接种菌根菌的植株,块根数较未接种者多。接种大孢子属菌种(Gig.)并施用ABA 1ppm,可使大理花(富贵乐)开花率较未接种者提高 40%。大理花实生苗以在15/13℃的生长较佳,而接种菌根菌在15/13℃并无促进作用,但在30/25℃时,植物鲜重、叶片数等都可达显著差异。喷施GA3会抑制块根鲜重,若接菌种且施用GA3(gibberellic acid),则可提高块根鲜重。

8. 生物技术

(1) 收集台湾地区豇豆属物种,包括台湾自生种的腺药豇豆和氏豇豆、长叶豇豆、滨豇豆、小豇豆、曲毛豇豆及披针叶豇豆等7个,及引进种的红豆、吉豆、绿豆、多年生蔓豇豆、米豆及豇豆等 6个,共13个物种,以逢机扩增多型性DNA(random amplified polymorpholic DNA,RAPDs)分析,探讨台湾豇豆属物种间的亲缘关系。以75个 逢机引子经由聚合酵素的链锁反应(PCR),RAPD产物呈现高度的多型性。由60个逢机引子产生的多型性DN*段,经不加权平均分群法(unweighted pair-group method using arithmetic average,UPGMA)归群分析,即可将13个物种明确分成5群,即腺药豇豆类、豇豆类、披针叶豇豆类、红豆绿豆类及长叶豇豆类等。

(2) 利用随机引子进行8个胡萝卜品种实生苗及种壳来源的体胚苗的RAPD(random amplified polymorphic DNA)分析,结果显示,不同单株间的核酸片段数目有差异,开放授粉品种的个体 间尤其明显,而F1品种间的核酸片 段也具有多型性,表示其纯度不高,品种内混有自然授粉产生的后代。利用 各种不同引子可分辨黑田及Hybrid Sweetness的实生苗与同一种壳来源的体胚苗RAPD核酸条带有差异。比较种壳核酸条带,可推测体胚苗应由母本子房组织在无贺尔蒙刺激的培养基中自发性产生,亦即体胚苗的遗传组成应与母本相同。因此,建议可利用种壳无菌培养诱导产生体胚,而将优良一代杂交种的母本还原。本地种芹菜的成熟叶片经由同功异构 (sodium dodecyl sulfate)蛋白质电泳分析,其中PGD酵素呈单一或三条带型,应为单一基因座控制的双元体酵素。西洋芹呈单条带型,其泳动速率较慢,与本地种不同。MDH酵素呈现一至六条条带的不同同功异构 ,供后裔分析的标志。高分子量的SDS蛋白质在参试的普通芹菜内存有许多变异性,但在芹菜管内则较少。

9.园产加工

研究证实鼠李糖半乳糖醛酸 在蔬果加工应用方面可提高如苹果、葡萄等果汁榨汁率、色素抽出率、便于过滤提高澄清度、及增加安定性等。另并对此酵素进行纯化与定性工作。

10. 景观与造园

(1) 研究植栽空间类型(开放、垂直、水平空间)、地板坡度(6度、15度)及地板坡向(仰角、俯角)等3个环境因子及不同的观赏序列对受测者的情绪体验及偏好的影响。结果得知,植栽空间类型及地板面的坡向,会影响受测者的各项情绪体验及偏好反应;而地板坡度不同,对受测者的各项情绪体验亦有显著的影响效应。在植栽空间序列的体验中,受测者由6度至15度的体验序列较15度至6度的体验序列,有较高的正向情绪体验;地板坡面采用较平缓的6度坡面较采用15度坡面,能给予受测者较高的正向情绪体验;而序列空间的「前一空间」及「后一空间」的类型,皆分别显著地影响受测者的各类情绪体验。

(2) 应用视觉仿真方法,以阳明山国家公园的擎天岗草原,及澎湖国家风景区的游憩海岸地区为研究对象。各仿真32张包含不同游客量的相片,并藉此仿*片对现地游客调查其拥挤感受、可接受度及满意度。研究结果发现:a.应用仿*片评估的结果,其常模强度及常模集中性皆高于游客对现地状况的评估,此结果显示应用视觉评估法评定社会容许量是可行的;b.若以常模强度及集中性比较3种评定容许量的指针,结果显示拥挤感受是最好的评估指针;c.游客特性、旅游特性、基地环境特性及活动种类、相片中前景及中景的游客人数等皆影响游客的拥挤感受、可接受度及满意度,且前景及中景的游客人数具交互作用的影响效果。

(3) 城乡居民休闲生活差异与其对社区公园需求的研究发现,城乡在资源上差异是明显的,但追寻都市生活,除就业与方便性外,相信公园等公共设施是提供一种生活品质的重要指针。

(二) 农机及农工学科

1998年,补助专题计划共26件,经费新台币13.81百万元,研究主题涵盖地化反应与地下水流的自组反馈、鱼道水理特性对鱼类溯*为影响、类神经网络于集水区降雨径流历程、优化模式与系统仿真对水库操作的研讨、稻谷间歇干燥、杆式喷药机静液压式传动系统、蔬菜种苗的生长动态、手提式光纤探针及光二极管排列分光光度计侦测水果的品质、蒜头干燥特性与方法、水果选别系统单位进料与连续取像机构、可自我调适的模糊类神经养殖池监控系统、挤压技术应用于生物分解性包装填充材料、蒸发散对土壤内热质传的影响、利用超音波侦测生乳品质牛乳体细胞数、流场特性对农业废弃物燃烧现象的影响,与“国产”单轴挤压机生产粿仔条等。兹简述研究成果如下:

1. 藉由发展一非线性地化模性模式,并利用移动边界线性稳定分析方法,探讨孔隙、渗透性变化和地化反应的交互作用。分析结果显示,对一平面浓度波前在大波长的扰动下,容易造成不稳定指状型态成长。

2. 利用无线电仪系统量测鱼类在各种试验鱼道中溯游速度的变化,建立鱼道水理特性与鱼类溯*为模式,找出有利鱼类溯流的鱼道设计条件,以提供台湾鱼道设计及改善的参考。

3. 分别以前向式类神经网络自组性算法与倒传递算法,对清水溪流域流量站多场短延时暴雨事件的径流历程做探讨,了解不同网络类型对历程内特性各事件仿真的优劣。

4. 结合线性规划的优化模式及系统仿真技术,以过去的操作管理资料为依据,求得较具弹性的操作规则,做为水库放水的依据。已初步建立石门水库的线性规划模式,利用历史流量纪录推导数个可行的操作法则。

5. 利用回归技术处理108个干燥处理条件下的薄层稻谷干燥数据,建立4种薄层干燥公式,包含热风湿度、绝对湿度、干燥时间和均化时间等4项干燥参数,并反应其影响程度。

6. 引进HyPneu个人计算机用工程分析软件,针对静液压系统做详尽完整的设计分析,提供厂商试造组装喷药机,以供农友使用。

7. 应用机器视觉自动化量测系统,以甘蓝、茶叶、苋菜为对象,进行种苗生长过程的动态量测,所得结果可用以仿真预测不同生长条件下的种苗生长速率,以提供种苗生产事业者在生产管理上的参考。

8. 利用近红外线分光光度计,取得梨的反射光谱,配合水果内部的糖度、酸度与糖酸比化学分析,用数学模式分析及统计回归方法,建立梨内部品质与近红外线反射式光谱的关系,以达到检测梨内部品质,提供其分级标准的目的。

9. 藉由比较探讨温度对蒜头干燥的影响,建立蒜头最佳干燥操作模式,以提供蒜农或大蒜加工业者参考使用,获致较佳干燥成品品质,增加其收益。

10. 进行单粒化进料与连续取样机构的研制,配合影像选别系统达到选别效果,以减少水果机械伤害。

11. 藉由研发可自我调适的模糊类神经养殖池监控系统,经测试整套系统,可达到水质控制与自动投饵判定的预期目标。

12. 藉由改变“国产”挤压机的操作条件及主原料玉米粉中添加聚乙烯醇(PVA)的含量,试制可膨发并可生物分解的包装填充材料,期能开发出可取代泡沫塑料的包装填充材料,以解决包装填充材料污染环境的严重问题。

13. 藉由实验观察干燥和湿润多孔体,分别在有表面蒸发与无表面蒸发条件下,水份在多孔体内的传输现象。实验结果显示,未考虑湿润面不稳定特性,无法说明复杂的传输现象,故须进一步由接口力探讨。

14. 利用超音波的特性—速度与衰减来探讨生乳的品质。经由超音波衰减的测定,可预估生乳体细胞数。因此,利用超音波来判断生乳品质是可行的,而超音波速度与体细胞数的间并无明显相关性。

15. 进行本省数量多的稻草、稻谷和花生壳燃烧时颗粒温度和重量的量测及排放气成分分析,进而探讨燃烧机构和速率,以提供燃烧装置设计和运转操上研究参考。结果显示,虽然试验温度不高,但燃烧所生成的有害气体浓度相当低。

16. 探讨“国产”单轴挤压机在生产台湾的中式米食—粿仔条的能力,结果显示,挤压程序变量显著地影响挤压粿仔条的物性, 如厚度、密度、切断力及折断力等。

(三) 植物保护学科

1. 病害研究

植物病理学科总共20件个别型计划,经费新台币13.83百万元。范围涵盖真菌分类、细菌分类、复合感染、病原遗传、病原抗药性、抗病机制及转基因植物抗病性等。昆虫学科总共19件个别型计划,经费新台币14.39百万元。范围涵盖昆虫分类、昆虫行为、生物防治、昆虫病毒及昆虫分子生物学等。成果说明如下:

(1) 真菌分类

调查台湾子囊菌,发现7种新纪录种,即Anthostomella tomicoides、Astrosph-aeriella minima、A.stellata、Caryospora phyllostachydis、Didymosphaeria fusispora、Phaeosp、haeria microscopica。有18个Geotrichum ludwigii 菌株、20个G.candim菌株及5个Galactomyces geotrichum菌株自台湾果园土壤分离,抽取各菌株的总DNA进行RAPD(random amplified polymorpholic DNA)增幅反应。各菌株间的遗传分析共享10个引子进行RAPD试验,属于同种的菌株间的DNA图谱极为相似。G. candim 的相似值介于0.70~0.97间,G. ludwigii 介于0.75~0.98间,Galactomyces geotrichum介于0.94~1.00的间。试验 结果发现,Galactomyces geotrichum并非Geotrichum candim的有性世代。

(2) 细菌分类

台湾152个Xanthomonas campertris pv.Vesicartoria菌株依生理特性、细胞组成及分子特性可分为A及B群。A群(113个菌株)均不含淀粉水解酵素及果胶分解活性,B群(39个菌株)则有。两群菌株在顺乌头酸盐(cis-aconitate)的利用,15:00 ante-iso酯肪酸含量及全细胞蛋白的电泳图谱均有显著差异。以*酵素Xba 1或Spe 1切割后,经脉冲电泳分析显示,同群菌株间的相似系数较高。以表现指多醣类相关的抗原决定部位DN*段序列所设计的引子对,由A 群供试菌株中皆可增幅出一个560 bp的DNA产物,而B群菌株中则无此产物。两群菌株以点渍杂配法估计DNA同构型,发现同群菌株间同构型超过70%,不同菌株间仅为12~58%。由上述结果可归纳台湾Xcv菌株为两大类群,依Xanthomonas属新分类,A群归属于X.axonopodis pv.vesicartoria,而B群为X. vesicartoria。

(3) 复合感染

探讨台湾中部地区12处茄科作物栽培田受茄科植物青枯病菌与植物寄生性线虫复合感染为害的情形,显示共9处栽培田发生青枯病菌与植物寄生性线虫共同感染的情形。由该9处栽培田内罹患青枯病的茄科作物根圈土壤中,分离出植物寄生性 线虫以南方根瘤线虫(Meloidogyne incognita)及北方根腐线虫(Pratylenchus penetrans)为主。对青枯病具不同抗感程度的西红柿品种或烟草品种,若先接种线虫(南方根瘤线虫或北方根腐线虫)后再接种青枯病菌、先接种青枯病菌后再接种线虫,及线虫和青枯病菌同时接种等3种复合感染处理,则复合感染处理后青枯病发病程度皆比单独接种细菌者为高,显示植物寄生性线虫与病原细菌复合感染茄科作物时,确有加重病害感染及降低抗病品种抗病性的趋势。

(4) 抗病机制

香菇太空包堆肥(spent forest mushroom compost,SFMC)对于抑制Pythium myriotylum为害西红柿幼苗具有显著的功效,其浸出液经过40至100℃处理10分钟后,可抑制P. myriotylum形成藏卵器与藏精器,如将SFMC浸出液稀释至5倍以上,即丧失其功效。SFMC组成分中的杂木锯屑(SA)、米糠(RC)、黄豆粉(SM)及碳酸钙(CC)浸出液均可抑制P. myriotylum形成藏卵器与藏精器,而米糠及黄豆粉两者的浸出液,更可抑制游走子的发芽管长度。以1 N NaOH 或HCl调整SFMC、RC及SM浸出液的酸碱值自4.0至8.0,仍能有效抑制 P. myriotylum形成藏卵器与藏精器及抑制游走子的发芽管长度,尤其在酸碱值低于4.5时,抑制效果最佳。利用高效能液相层析仪检测 SFMC、RC及SM的浸出液时,发现三者在层析仪运转至38.48分时均可出现一个波峰,该波峰的萃取液均能抑制 P. myriotylum游走子发芽及发芽管长度。以光学显微镜观察发现,利用SFMC栽种的西红柿根系较种在BVB No.4者更具有抵抗 P. myriotylum侵入根系内部组织的效果。其中栽种在SFMC的西红柿根部,其表皮细胞内充塞有棕褐色的物质,而在荷兰四号泥碳苔介质(BVB No.4)栽种者并无此现象。

(5) 病原遗传

201个青枯病菌菌株,分别为46个来自西红柿生产田及155个来自青枯病病圃。病圃菌株的来源包括土壤以及抗病与感病西红柿品种。各菌株的基因型指纹以2种PCR方法取得,其中,生产田族群以RAPD及rep-PCR方法分析,而病圃族群仅以RAPD方法分析。结果显示,两个族群均具有极高的遗传差异性。初步分析青枯病菌族群架构显示,生产田族群在生化型及地域性上略呈分化现象。由病圃族群分析结果发现,微环境因子及寄生基因型可造成族群分化。

(6) 抗病机制

为监测重要病害芒果炭疽病对田间治疗性杀菌剂扑克拉的感受性及抗药风险,利用卫星定位仪进行定点追踪采样,共计采集43个采样点,总共测试菌株545个。以南化为圆心,半径四公里内选择20个 采样点,共采得59个菌株。炭疽菌对 扑克拉的感受性呈常态分布,范围在0.009~0.09mg/L的间,不与地理区呈相关。于高频度用药范围共采得163个菌株,得知该区的病原菌族群仅具较高的耐药性,并未有抗药性族群存在。

(7) 转基因植物抗病性

西瓜银斑病毒(watermelon silver mottle virus,WSMV)为Tospovirus 的一属,其核鞘蛋白(NP)已构筑于二位农杆菌载体,并成功转入甜瓜的染色体中。以聚合 链锁反应,可放大出0.7kb的NP基因片段;以西方转渍法,可侦测 31 kDa核鞘蛋白;在酵素连结免疫反应 (ELISA)测试中,转型植物的读值明显大于正常植物。此外,约有3/4数量的自交子代能在康霉素(kanamycin)选择性培养基上存活,由此可知WSMV的NP基因确实转入甜瓜中,日后将测试转基因甜瓜对 WSMV的抗性。

2. 虫害研究

(1) 昆虫分类

台湾纤蟋蟀亚科的分类架构已有改变,有必要再加以重新整理。本研究除对台湾的材料进行传统分类工作,将常用的各种特征详加绘图、描述以供比对外,同时依现代分类及蟋蟀生物系统分类学的需要,增列此一类群各种的基本生物学特性如栖所及寄主植物等,以期未来深入了解此一分类群的类缘关系。

台湾产粉虱科(同翅目)与针蚁亚科(膜翅目)以传统型态、显微构造比较等方法进行系统分类学研究,并以量化的型态资料做为分类群内或群内的系统分析。往后将以完成《台湾昆虫志》粉虱与蚂蚁的专论为首务,并综合应用各种技术,将昆虫分类朝向多元的系统发展,以更多的分类特征所获得的资料来分析物种的类缘关系,以期建立一套合理完整的分类系统。

台湾内茧蜂亚科隶属膜翅目、小茧蜂科,乃鳞翅目昆虫的重要寄生性天敌,全世界约有50属、650种以上。台湾已记录者约有9属、17种。本研究记录台湾的内茧蜂有2族、17属、22种,其中有8属为台湾新纪录属、有5种为台湾新纪录种。其中Macrostomion sumatranum(Enderlein)为首次饲育的一种未定名的天蛾。

对蜡蝉总科雄虫性器可能已找到全新解说,如各部分的缘起、阳茎、基板的界定,同源及演化趋势等。

(2) 昆虫行为

双纹姬蠊成虫寿命以交尾雌虫最长,*雌虫次的,而雄虫最短。双纹姬蠊*雌虫除了周期性卵鞘形成会妨碍交尾外,卵巢必须经过一段发育期,才能成功交尾。雌虫成功交尾也会有缩短怀孕间期的情形,成功的交尾也会促使第一个卵鞘正常形成,*雌虫第一个卵鞘通常都是畸形的,因为卵鞘腔无法圈住卵鞘,便很快掉落。本研究对双纹姬蠊与

热心网友 时间:2023-12-02 15:31

1 范围
GB/T18654的本部分规定了鱼类染色体组分析的试剂和材料、仪器和设备、玻片标本的制备和组型分析。
本部分适用于鱼类染色体组型分析,对于水产养殖中的其他水生动物亦可参照执行。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过GB/T18654的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单或修改版均不适用于本部分,然而,鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本部分。
GB/T18654.2 养殖鱼类种质检验 第2部分:抽样方法
3 术语和定义
下列术语和定义适用于GB/T18654的部分。
3.1
体细胞外培养法
通过无菌操作,获取的肾脏组织或血细胞,在体外培养过程中,加入细胞*刺激物,刺激淋巴细胞大量进入*状态。然后,加入适量浓度的秋水仙素,使细胞*被阻抑在*中期,而获得鱼类细胞染色体中期*组。
3.3
体细胞直接法
将小鱼浸泡在适当浓度的秋水仙素溶液中,使其*旺盛的鳃丝上皮细胞被阻抑在*中期,而获得鱼类细胞染色体中期*相。
3.4
胚胎细胞直接法
选用发育正常的囊胚期或原肠期早期胚胎,将其细胞吹打分散后,加入适当浓度的秋水仙素 ,阻抑在*中期,获得鱼类染色体中期*组相。
3.5

空气干燥法
将收集的细胞经过低渗、固定、滴片,然后斜放静置,待其自然干燥。
3.6
火焰干燥法
将收集的细胞经过低渗、固定、滴片,然后立即将玻片置于酒精灯的火焰上均匀烘烤,或直接将玻片置于火焰上滴片。
3.7
臂比
染色体的长臂长度与短臂长度之比。
3.8
相对长度
每条染色体长度与单倍体组染色体总长度之比,以百分值或千分值表示。
4 方法提要
使用细胞*刺激物刺激鱼类淋巴细胞*,或者直接收集*旺盛鳃丝上皮细胞、胚胎细胞。然后利用秋水仙素破坏纺锤丝阻抑在*中期,再经过低渗、固定、滴片和染色,最后进行镜检分析。
5 试剂和材料
5.1 肝素溶液:浓度为500IU/ML
5.2 小牛或胎牛血清。
5.3 青霉素、链霉素和卡那霉素。
5.4 培养基:TC—199、RPMI—1640或EAGLESMEM。
培养液配制方法:上述培养基80%加20%小牛或胎牛血清,每毫升培养液含青霉素、链霉素、卡那霉素分别为100IU、100MG、50IU,用碳酸氢钠溶液调至PH7.2。
5.5 植物血球您凝集素(PHA)溶液,根据厂家推荐剂量使用。
5.6 生理盐水:0.75%氯化钠溶液。
5.7 秋水仙素溶液:浓度为20UG/ML~40UG/ML。
5.8 甲醇。
5.9 冰乙酸。
5.10 固定液:3份甲醇加1份冰乙酸,现用现配。
5.11 低渗溶液:0.0375MOL/L 氯化钾溶液。5.12 吉姆萨原液:称0.5GGIEMSA粉,甘油33ML,在研钵内用少量甘油与GIEMSA粉混合,研磨至无颗粒,再将剩余甘油倒入,在56度条件下保温2小时后,加入33ML甲醇,保存于棕色瓶内。
5.13 磷酸缓冲液(PBS):浓度为0.2MOL/L

6 仪器和设备
6.1 无菌室。
6.2 超净工作台。
6.3 恒温培养箱或二氧化碳培养箱。
6.4 离心机。
6.5 天平(感量0.00001G)
6.6 显微镜(带显微摄影)
6.7 照相机
6.8 整套暗室设备。
6.9 游标卡尺(精度0.01MM)
6.10 温控电热板
6.11 解剖工具一套
6.12 注射器针头
6.13 可调移液器10UL~200UL。
6.14细口吸管、吸管5ML~10ML离心管、冰冻及干热载玻片。
6.15 25ML培养瓶或青、链霉素小瓶,瓶塞等。
7 玻片标本的制备
7.1 抽样
样品鱼的抽样按GB/T1865402的规定执行。
7.2 体细胞体外培养法
体细胞体外培养法常采用肾组织细胞培养和血细胞培养,本部分仅规定了肾组织细胞培养的操作步骤,细胞培养的操作步骤见附录A。
7.2.1 将式样鱼鳃血管剪断,尽量放血。刮去鱼体一侧的鳞片,尤其是解剖部位需刮干净。
7.2.1 把鱼放在超净工作台上或无菌室里,铺上消毒纱布,用碘酒和酒精棉求依次消毒已去鳞的部位。
7.2.3 吸取3ML~5ML培养液置于青霉素瓶中。
7.2.4 用解剖刀沿脊椎下方切开适当长度,用解剖剪将肋骨剪断,露出肾脏。
7.2.5 用镊子夹取适量肾组织,放入盛有培养液的青霉素瓶中,将组织块用镊子撕碎,轻轻搅动,然后静置三分钟到五分钟,待未撕碎的组织块沉淀。用刻度吸管吸取上部细胞悬液,移入培养瓶中,再加入适量的培养液,使每瓶为4ML或5ML细胞的密度可根据目测浊度进行粗略调整,或用血球计数板计数后确定,一般为(5~10)*10E个/ML。
7.2.6 用注射器滴加PHA,一般为5ML培养液加0.1ML~0.2ML。盖上胶塞,轻轻摇匀。
7.2.7 将以种的培养瓶放在恒温培养箱或二氧化碳培养箱内。培养温度一般为18到28度,时间1D~5D。期间,细胞一般*1~4次。可根据具体情况选用合适的培养温度和时间。每天需将培养瓶轻轻摇动1~2次。
7.2.8收集细胞:在收集细胞前1。5H~4H,用可调移液器加入秋水仙素溶液,使其倒入离心管,再用少数生理盐水将培养瓶内残留细胞洗出,再倒进离心管。
7.2.9 低渗:将收集有细胞的离心管以700R/MIN~1000R/MIN离心5MIN。然后轻轻吸除上清液,约留0.5ML~1ML现配固定溶液,吹打均匀,以700R/MIN~1000R/MIN离心5分钟。
7.2.10 固定:先吸除上清液,加入少许固定液,吹打均匀,再加入2ML~3ML固定液,静置20分钟,按

7.2.9 规定离心。再重复规定,必要时可重复固定三次。
7.2.11 滴片:吸除上清液,加适量现配固定液,将细胞吹打均匀。吸取细胞悬液
在45度倾斜的冰冻玻片上滴2~3滴,并轻轻吹动,使细胞铺散开。然后将铺散细胞
的玻片斜放静置,待其自然干燥,此为空气干燥法。有时为使染色体分散更好,可采用火焰干燥法。
7.2.12 染色:用磷酸盐缓冲液(PH=7.2)将GIEMSA原液按9:1稀释,配成工作液
(用时配)。取一块干净的玻璃,以略小于玻片长度为间距放置干净玻片作架,将待染的玻片置于染色的容器内,将染液加入,染色10MIN~20MIN后取出,用自来水冲去染液,干燥后即可用于观察分析。
7.3 体细胞体内培养法
7.3.1 往样品鱼腹腔注射PHA溶液,剂量按厂家推荐剂量使用。然后继续饲养6~120H。
7.3.2 处死鱼前2~6H,按1UL/G鱼体腹腔注射秋水仙素溶液。将腮丝血管剪断,尽量放血,取出肾脏组织,放入盛有3ML~5ML生理盐水的青霉素瓶中。将组织块撕碎,用镊子轻轻搅动后静置3MIN~5MIN,待未碎的组织块沉淀,用吸管吸取细胞悬液,加入离心管中。
或者不注射秋水仙素,而是先将肾组织取出,撕碎,放入盛有培养液的青霉素瓶中,加入秋水仙素溶液,终浓度为0.1UL/ML~0.5UL/ML培养液,于25度静置2H~3J。然后用镊子轻轻震荡,待稍沉淀后,用吸管吸出上层细胞悬液,加入离心管中。
7.3.3 低渗、固定、滴片、染色分别按7.2.9~7.2.12的规定执行。
7.4 体细胞直接法
此法适用于难以取肾的小鱼。
7.4.1 将式样鱼放入含有0.1%秋水仙素溶液的容器中浸泡6小时左右。
7.4.2 放血杀鱼,小心把鳃片剪下,将腮丝放入甲醇:冰乙酸为9:1的固定溶液中浸泡处理7MIN~10MIN,再转入100%的冰乙酸中浸泡处理1MIN!2MIN。
7.4.4 卡诺氏固定溶液2~3次,每次一小时,最后一次可放在常温或冰箱中1小时到十五小时。
7.4.5 滴片前,将固定过的腮丝放入50%的冰乙酸中,用镊子夹注腮丝轻轻震动,是细胞从腮丝上脱落,丢弃鳃弓鳃丝,液体则为细胞悬液。
7.4.6 将细胞悬液滴到控温电热板上50度至60度的干净玻片上,5分钟后吸弃多余液体。
7.4.7 染色按7.2.12的规定执行。
7.5 胚胎细胞直接
7.5.1 用大口径吸管挑选发育正常的胚囊期或原肠期早期胚胎。
7.5.2 孵性卵,则用口径稍大于胚胎的小口吸管吸破卵膜,再将胚胎细胞吸入离心管中。粘性卵,则用铲形镊子将卵膜挤破,用吸管将胚胎细胞吸入离心管中。
7.5.3 用吸管把胚胎细胞吹打散开,补加生理盐水至4ML~5ML,再加入秋水仙素溶液,终浓度为10UL/50UL,静置15MIN~60MIN。
7.5.4 低渗按7.2.9规定进行。
7.5.5 固定、滴片、染色分别按7.2.10~7.2.12规定执行。
8 组型分析
8.1 染色体数的确定
在油镜下选取50~100个分散良好,形态清晰,数目完整的*组,计数每个*相的染色体数目,找出染色体数目的众数,并计算众数所占百分比,拒此确定鱼的染色体数。
8.2 染色体分组和臂数的计算
8.2.1 鱼类染色体分组一般按臂比将染色体分为四组:
A)中部着丝粒染色体M组,臂比为1.00~1.70;

B)亚中部着丝粒染色体SM组,臂比为1.71~3.00; C)亚端部着丝粒染色体ST组,臂比为3.01~70..; D)端部着丝粒染色体T组,臂比为7.00~无穷 8.2.2 染色体臂数(NF)的计数:中部和亚中部着丝粒的臂数计为2,亚端部着丝粒染色体的臂数计为1。 8.3 染色体分组方法
在油镜下选取10~15个数目完整,分散良好,长度适中(正中期),着丝粒清楚,两条染色单体适度分开,形态清晰的*相进行显微摄影。显微摄影的有关事项参见附录B。在照片上用游标卡尺测量每条染色体的长臂和短臂长度,按8.2.1的规定将染色体分组,并按8.2.2的规定确定染色体的臂数得出核型公式然后计算得出核型指数,包括臂比和相对长度,大小配对,并按M、SM、ST和T组顺序排列,每组内染色体按相对长度从大到小排列、贴好,然后翻拍。 8.4 核型公式
根据十个以上的中期*染色体测量分组等分析的结果,就可确定该种鱼类的染色体数目,染色体分组情况,染色体臂数和染色体的相对长度。表示这一结果的表达式称为核型公式。
示例:某鱼的核型公式为2N=48,26M+14SM+8ST,NF=88。 8.5 其他形态特征的观察
除计数和分组外还需要观察染色体的其他形态特征,如有无异性染色体对,次缢痕,随体等,并计入结果。

热心网友 时间:2023-12-02 15:32

采用脾脏、肾脏细胞或鳃组织细胞,用空气干燥法制片,Giemsa染色,对生活在近海沿岸的鱼类染色体组型进行分析,绒杜父鱼(Hemitripterus villosus Pallas)的染色体组型构成公式为2n=46=20m+16sm+10t,总臂数NF=82;绵鲥(Zoarces elongatus Kner)的染色体组型构成公式为2n=48=30m+14sm+4t,总臂数NF=92;短颌小绵鲥(Zoarchias microstomus)的染色体组型构成公式为2n=28=24m+4t,总臂数NF=52;燧 (Azumaemmnion)的染色体组型构成公式为2n=56=6m+10sm+40t,总臂数N

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采用脾脏、肾脏细胞或鳃组织细胞,用空气干燥法制片,Giemsa染色,对生活在近海沿岸的鱼类染色体组型进行分析

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采用脾脏、肾脏细胞或鳃组织细胞,用空气干燥法制片,Giemsa染色,对生活在近海沿岸的鱼类染色体组型进行分析,绒杜父鱼(Hemitripterus villosus Pallas)的染色体组型构成公式为2n=46=20m+16sm+10t,总臂数NF=82;绵鲥(Zoarces elongatus Kner)的染色体组型构成公式为2n=48=30m+14sm+4t,总臂数NF=92;短颌小绵鲥(Zoarchias microstomus)的染色体组型构成公式为2n=28=24m+4t,总臂数NF=52;燧 (Azumaemmnion)的染色体组型构成公式为2n=56=6m+10sm+40t,总臂数NF=72;红狼牙虎鱼(Odontamblyopus)的染色体组型构成公式为2n=38=20m+18sm,总臂数NF=76

热心网友 时间:2023-12-02 15:34

染色,对生活在近海沿岸的鱼类染色体组型进行分析
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