也没有 转基因 芒果
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发布时间：2023-08-04 21:51
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时间：2024-12-14 13:58
Colas等[1 ]首次从芒果中分离到选择性氧化酶基因,用PCR引物扩增了芒果叶片基因组DNA,获得了1个623 bp的可编码207个氨基酸的开放阅读框,用此片段筛选成熟芒果中果皮cDNA文库,得到了1个全长cDNA克隆PAOM I. 1,可编码318个氨基酸,与大豆、拟南芥同一基因的同源性分别为64%和68%, Southern杂交显示为单拷贝基因,这是首次从分子水平上分析跃变型果实的选择性氧化酶。Lycett等[ 2 ]从芒果果实中分离到多个新的成熟特异cDNA克隆,用Tommy Atkins品种的未熟果实和乙烯诱导成熟的果实构建了2个cDNA文库。
Bojorquez等[ 3]通过差异筛选芒果成熟果和未成熟果mRNA的cDNA文库,分离出了过氧化物酶体(Peroxisomal)的硫解酶,其在成熟果中被诱导表达。Northern分析表明:该酶在果实成熟时的脂肪酸代谢中发挥作用,随果实成熟表达量增加。
肖洁凝等[ 4 ]利用抑制性扣除杂交( Supp ressive Sub2tractive Hybridization, SSH)方法,以子叶切段远轴切面作为参照样品,近轴切面仁为检测样品,构建了正向差异cDNA文库,分离了与芒果子叶切段不定根形成相关基因的cDN*段。经Virtual Northern杂交分析表明,获得了6个阳性克隆序列,同源性比较结果表明:这些cDN*段均为首次报告,它们分别与转运蛋白、转录*因子及酶基因的DNA序列同源。
肖洁凝等[ 5 ]通过SSH法获得了1个与不定根形成相关的差异表达的cDN*段,其推导的氨基酸序列与拟南芥的生长索反应因子(ARF)类蛋白具有较大的同源,因此将它命名为MiARF,用所设计的基因特异引物进行3′RACE扩增。M iARF2 仅具有DBD 保守区并与M iARF1的基本相同,但缺乏Ⅲ、Ⅳ区域。Virtural Northern杂交表明:M iARF2在生根的组织中表达水平高,而在非生根的组织中未见表达;M iARF1在生根及非生根的组织中均有表达。
参考文献
[ 1 ] Kolas M, Fournier R E. Position - independent Transgene ExpressionMediated by Boundary Elements from the Apolipoprotein B Chromatin Domain[ J ]. Mol. Cell Biol. , 1995, (15) : 198～207.
[ 2] Streuli C H. ExtracellularMatrix and Gene Expression inMammary Epithelium[ J ]. Semin Cell Biol. , 1993, (4) : 203～212.
[ 3 ] Wheeler T T, CallaghanM R,Davis S R, et al. Milk Protein Synthesis, Gene Expression, and Hormonal Responsiveness in Primary Cultures ofMammary Cells from Lactating Sheep [ J ]. Exp.Cell Res. , 1995, 217 (2) : 346～354.
[ 4 ] 肖洁凝,黄学林,张以顺,等. 与芒果子叶切段不定根形成相关基因的cDN*段的克隆[ J ]. 植物生理与分子生物学学报, 2004, 30 (2) : 136～140.
[ 5 ] 肖洁凝,黄学林,黄霞,等. 芒果生长素反应因子类蛋白的cDNA克隆和表达[ J ]. 生物工程学报, 2004, 20 (1) : 59～62.
