碱裂解法提取质粒过程溶菌酶的作用

发布网友发布时间：2023-07-26 18:33

共2个回答

热心网友时间：2024-08-21 08:11

跟SDS一样，裂解细胞壁释放质粒用的。
不过不加也没什么问题，NaOH与SDS足够将大肠杆菌细胞壁裂解开。

热心网友时间：2024-08-21 08:11

碱裂解法的裂解液中起主要裂解作用的是NaOH，NaOH可以将细胞膜裂解开，对于革兰氏阴性菌，如大肠杆菌，这类菌，细胞壁很薄，细胞膜裂解后，该菌体就会裂解，所以含有NaOH的裂解液裂解效果明显。
但对于革兰氏阳性菌，如乳酸菌，这类菌细胞壁较厚，NaOH无法进行有效裂解，而溶菌酶主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。当然，对于这种难裂解的细胞，加溶菌酶或煮沸都是一种有效的裂解方法。