在色素分离实验中胡萝卜素层析速度最慢的原因有哪些?
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发布时间:2023-12-08 20:11
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时间:2024-01-03 05:21
答:胡萝卜素溶解度大,扩散速度快;叶绿素b溶解度最小,扩散速度最慢。
在叶绿体色素的提取和分离实验中,(1)实验原理:用纸层析法分离色素的原理是:四种色素在层析液中的溶解度不同,随着层析液扩散的速度不同,在层析液中溶解度越大,扩散的速度越快,反之则越慢。(2)实验过程。快速、充分研磨。根据叶绿体中的色素在有机溶剂(乙醇、丙酮等)中溶解的特性,用丙酮可将色素从叶片中提取出来(若用95%的酒精作溶剂,则应向色素提取液中加入无水碳酸钠,除去色素提取液中的水分。若用丙酮作溶剂,则用量不宜过多,以2~5mL为宜,过多会影响色素浓度,过少不易过滤),过滤后收集滤液(将研磨液迅速倒入基部已放—块单层尼龙布的漏斗中过滤),将滤液收集到小试管中,及时用棉塞将试管塞紧备用。注:也可以不过滤,加入适量的丙酮把叶子研磨成糊糊状,再用载玻片(或木工用的竹笔)的一端蘸取研磨液直接点样即可。将干燥过的定性滤纸剪成6 cm×l cm的条,一端剪去两角,距该端lcm处用铅笔画一条极细的横线。用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀画一条细而直的滤液线,待干燥后再重复画2~3次(次数越多色素越多)。将干燥后的滤纸条画线一端朝下放入有少许 (2~3mL)层析液的烧杯中,盖上培养皿。观察层析后,取出滤纸条,烘干后观察色素分离情况。(3)实验结果及分析:从色素带的宽度可推知色素含量的多少依次为:叶绿素a,叶绿素b,叶黄素,胡萝卜素。从色素带的位置可推知色素在层析液中的溶解度大小依次为:胡萝卜素,叶黄素,叶绿素a, 叶绿素b。