如何用primer premier 5.0设计引物?设计引物要注意哪些细节?

发布网友发布时间：2022-05-01 09:33

共2个回答

热心网友时间：2022-06-27 14:44

下载的5.0版注册一下就能用了，应该有中文说明设计引物的方法，看说明学习一下就可以了。
主要注意的有几个方面：
1：上游引物可以手动添加或删除密码子以改变其长度，因为不会影响到起始密码子，而下游由于最后是终止密码子，所以不可以手动添加或删除，只能通过File-Preference中的length改变长度，一般来说最短不要小于18.
2：引物结构的吉布斯自由能变最好在0-10，但不是特别严格，最好不要小于-10.
3：比较重要的一点是上下游引物的Tm 相差要小于2°C。
4：设计完检查时要注意3’端不能有发夹结构。
说的可能不很全面，设计时具体问题具体分析吧

热心网友时间：2022-06-27 14:45

如果你要扩展的基因已经测序完成，你在网上找到序列，输入primer5，然后点primer就可以了，然后你可以手动或自动更改，知道达到的你的要求。
如果你扩增的基因还未测序完成，你只能通过别人克隆出来的相关基因设计引物，方法同上