有没有人用过sigma的DCFH-DA检测过ROS

发布网友发布时间：2022-05-01 12:37

共2个回答

热心网友时间：2023-10-12 16:25

1.高清播放机的芯片：高清播放机使用的芯片，目前主要有Sigma Marvell MTK Realtek 芯片
2.芯片的优略势：
Sigma 864X系列芯片：
优势：芯片性能好，支持主流高清格式，如ISO,MKV,TS,AVI,MOV,MP4，画质色彩浓郁，支持源码输出，支持导航，经典机型：碧维视BV8088 ；劣势：不支持RMVB格式。
Sigma 867X系列芯片：
优势：性价比方案支持标清480p RMVB ；劣势：没有导航
注：Sigma目前在市面上还没有3D机器，其3D方案的芯片SMP8910还没有机型

Marvell 88DE3010方案芯片：
优势：画质还原度高，支持蓝光导航，3D效果好，支持源码输出，支持主流高清封装格式：ISO,MKV,MOV,AVI,MP4,TS；
劣势：TS的支持不太好。经典机型：碧维视BV8078M

MTK 8555方案
优势：支持的格式广，播放流畅。劣势：音效一般，画质一般

Realtek 1185 优势：同上劣势：同上 Realtek 1186 优势：同上，支持3D 劣势：同上

热心网友时间：2023-10-12 16:26

DCFH-DA 的使用步骤：
DCFH-DA 使用仅提供指导和参考，具体实验方案应针对您的特定应用进行修改：
1. BCECF开封前，适当的做离心，以保证粉末落入样品管低,确保染料足量；
2. 加入适量无水DMSO（DMSO检验用有机滤器进行过滤使用）或者其他有机溶剂配制成 1～10mM储存液进行使用，剩余的制备液分装存储，避免重复冻融影响试剂活性；
3. 正式开始实验前，采用生理盐缓冲液（常用的缓冲液有：PBS缓冲液，HBSSS缓冲液和HEPESS缓冲液）稀释至工作浓度1～10μM之间，不同实验需根据需求调整至合适的工作浓度；
4. 从培养基中取出细胞，向细胞中加入染料工作溶液，然后在室温或 37℃条件孵育细胞 5-60 分钟时长；
5. 吸走染色用的工作液，然后用预热的缓冲液或细胞培养液进行清洗一遍。之后再加入预热的缓冲液或者细胞培养液，在适宜恒温条件下孵育。对于二乙酸酯的衍生物，需要短暂复原时间让细胞内酯酶将其水解，从而让染料对氧化应激产生反应。最佳的复原时间范围很广，由于某些细胞类型通常显示极其低水平的酯酶活性；
6. 将细胞置于刺激物钱，需要先测定加载细胞的背景荧光强度；
7. 评估阴性对照：

绿色发射光谱内检查未染色细胞的自荧光情况；

对于流式分析，查明染料加载和处理后细胞的前向角散射和侧向角散射是不变。细胞尺寸的变化可能与起泡或萎缩有关，由于处理或有毒反应引起的。

对包含和不包含刺激物的染料和缓冲液/培养基的无细胞混合物进行荧光检测。在不含细胞外酯酶和其他氧化酶的情况下，随着时间荧光的逐渐增加可能与瞬间水解、空气氧化、和/或光诱导氧化有关。

检查培养在生长培养液或简单缓冲液内的未处理加载细胞（对照）的荧光。在健康细胞内，细胞内酶和/或天然抗氧化剂会清除这些氧自由基。经过染料加载复原时间后，健康细胞应该表现出低水平的荧光信号，且在整个实验期间相对稳定。然而，逐渐增加（由于自氧化）或降低（由于细胞内染料丧失或光淬灭）也有可能观察到。在不含任何刺激物或诱导剂的体系内，健康和未处理细胞突然发现强荧光，表明细胞发生死亡或一些其他的氧化事件。