SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质的实验中,当分离胶加...9
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发布时间:2023-11-07 22:18
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时间:2024-04-06 05:21
加一层水称为水封
目的是隔绝空气使催化反应快速进行,进而形成凝胶,还可使分离胶上沿平直。
并且加水后,保持分离胶表面的平整性,使浓缩胶和分离胶都处于同一水平面上。
甘氨酸是为了解离出甘氨酸根离子,甘氨酸根离子可以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩在一起。
样品液煮沸这个问题我个人认为是可以商榷的,因为理论上煮沸可以使SDS和蛋白更快更好的结合,以便于SDS-PAGE的进行。但是有些蛋白似乎不煮沸直接上样结果更好。对于非还原Loading buffer(即不含巯基乙醇)的样品,一般是不要煮沸的。
长时间的电泳会使正极变酸,负极变碱。