质粒dna提取中加入溶液二后,为什么溶液变得粘稠
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发布时间：2022-04-30 15:02
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时间：2022-06-25 21:10
原因:变了性的DNA和蛋白 加入溶液II后，菌体裂解，蛋白和DNA变性并溶解。导致整个溶液非常粘稠，能拉出丝来。
加入溶液二为碱处理。其中NaOH主要是为了溶解细胞，释放DNA，因为在强碱性的情况下，细胞膜发生了从双层膜结构向微囊结构的变化。SDS与NaOH联用，其目的是为了增强NaOH的强碱性，同时SDS作为阴离子表面活性剂破坏脂双层膜。
本步骤注意事项：
第一，时间不能过长，因为在这样的碱性条件下基因组DN*断也会慢慢断裂；
第二，加溶液二后，操作一定要温和，剧烈混合会导致基因组DNA污染。
扩展资料
质粒提取窍门：
1、洗脱时60℃温育（Ellution Buffer）洗脱缓冲液或去离子水效果更好。
2、菌体应彻底悬浮 ， 如果没有彻底悬浮菌体，则残留的菌体团块在溶液 II 加入后，变成难以完全裂解的团块。这个团块在溶液 III 加入后，会有一部分蛋白质继续存在于溶液中，成为蛋白质残留的最大根源。
3、测量DNA溶液的体积，按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。
参考资料来源
百度百科-质粒抽提
百度百科-质粒DNA纯化
