猝灭荧光强度先下降后增强怎么办

发布网友发布时间：2022-04-30 15:58

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热心网友时间：2022-06-26 22:18

影响荧光及强度的因素。1 )跃迁类型：通常，具有π—π* 及 n —π*跃迁结构的分子才会产生荧光。而且具π—π*跃迁的量子效率比 n —π*跃迁的要大得多(前者大、寿命短、 kISC 小)。2 )共轭效应：共轭度越大，荧光越强。3 )刚性结构：分子刚性( Rigidity )越强，分子振动少，与其它分子碰撞失活的机率下降，荧光量子效率提高。如荧光素(φ大)与酚酞(φ=0 )；芴(φ=1 )与联苯(φ=0.18 )。4 )取代基：①给电子取代基增强荧光( p-π共轭)，如 -OH 、 -OR 、 -NH2 、 -CN 、 NR2 等；②吸电子基降低荧光，如 -COOH 、 -C=O 、 -NO2 、 -NO 、 -X 等；③重原子降低荧光但增强磷光，如苯环被卤素取代，从氟苯到碘苯，荧光逐渐减弱到消失，该现象也称重原子效应。5 )溶剂效应：①溶剂极性可增加或降低荧光强度(改变π—π*及 n —π*跃迁的能量)；②与溶剂作用从而改变荧光物质结构来增加或降低荧光强度。6 )温度：温度增加，荧光强度下降(因为内、外转换增加、粘度或“刚性”降低)。因此体系降低温度可增加荧光分析灵敏度。7 )pH 值：具酸或碱性基团的有机物质，在不同 pH 值时，其结构可能发生变化，因而荧光强度将发生改变；对无机荧光物质，因 pH 值会影响其稳定性，因而也可使其荧光强度发生改变。8 )内滤光和自吸：体系内存在可以吸收荧光的物质，或荧光物质的荧光短波长与激发光长波长有重叠，均可使荧光强度下降，称为内滤光；当荧光物质浓度较大时，可吸收自身的荧光发射，称为荧光自吸。9 )荧光猝灭：①碰撞猝灭；②静态猝灭；③转入三重态的猝灭；④电子转移猝灭；⑤自猝灭。且有定量关系，所以会产生荧光猝灭，由于猝灭剂正比增加猝灭剂浓度越大，生成的该种稳定物质越多荧光分析中中性红加入农药荧光强度为什么会变化是因为猝灭剂和荧光物质生成某种稳定不易产生荧光的化合物，强度本身与荧光物质浓度有正比关系，剩余荧光物质正比减少分子所处的外界环境，如温度、溶剂、pH、荧光熄灯灭剂等都会影响荧光效率，甚至影响分子结构及立体构象，从而影响荧光光谱和荧光强度。了解和利用这些因素的影响，可以提高荧光分析的灵敏度和选择性。温度对于溶液的荧光强度有着显著的影响。在一般情况下，随着温度的升高，荧光物质溶液的荧光效率和荧光强度将降低。这是因为，当温度升高时，分子运动速度加快，分子间碰撞概率增加，使无辐射跃迁增加，从而降低了荧光效率。例如，荧光素钠的乙醇溶液，在0℃以下，温度每降低10℃，在荧光效率增加3％，在—80℃时，荧光效率φf为1。同一物质在不同溶剂中，其荧光光谱的位置和强度都有差别。一般情况下，荧光波长随着溶剂极性的增大而长移，荧光强度也有增强。这是因为在极性溶剂中，π→π*跃迁需要的能量差ΔE小，而且跃迁概率增加，使紫外吸收和荧光波长均向长移，强度也增强。溶剂粘度减小时，可以增加分子间碰撞机会，使无辐射跃迁增加而荧光减弱。故荧光强度随溶剂粘度的减小而减弱。由于温度对溶剂的粘度有影响，一般式温度上升，溶剂粘度变小，因此温度上升荧光强度下降。当荧光物质本身是弱酸或弱碱时，溶液的pH对该荧光物质的荧光强度有较大的影响，这主要是因为弱酸弱碱和它们的离子结构有所不同，在不同酸度中分子和离子间的平衡改变，因此荧光强度也有差异。在每一种荧光物质都有其适宜的发射荧光的存在形式，也就有相应的pH范围，一保持荧光物质和溶剂之间的离解平衡。苯胺在pH为7~12的溶液中主要以分子形式存在，由于—NH2为提高荧光效率的取代基，故苯胺分子会发生蓝色荧光。但在pH＜2和pH＞13的溶液中均以苯胺离子形式存在，故不能发射荧光。荧光熄灭又称荧光猝灭，是指荧光物质分子与溶剂分子或其它溶质分子相互作用引起荧光强度降低的现象。荧光熄灭剂可以促进这种现象的发生。散射光对荧光测定有干扰，尤其是波长比入射光波长更长的拉曼光，因其波长与荧光波长接近，对荧光测定的干扰更大，必须采取措施消除。例如，可以增加分子间碰撞机会，荧光素钠的乙醇溶液，溶液的pH对该荧光物质的荧光强度有较大的影响。故荧光强度随溶剂粘度的减小而减弱。 4，π→π*跃迁需要的能量差ΔE小，必须采取措施消除。一般情况下、荧光熄灯灭剂等都会影响荧光效率，温度每降低10℃。这是因为在极性溶剂中。但在pH＜2和pH＞13的溶液中均以苯胺离子形式存在，使无辐射跃迁增加.荧光熄灭剂　　荧光熄灭又称荧光猝灭，从而影响荧光光谱和荧光强度，由于—NH2为提高荧光效率的取代基。在每一种荧光物质都有其适宜的发射荧光的存在形式，从而降低了荧光效率。　　2、溶剂　　同一物质在不同溶剂中，当温度升高时、pH的影响　　当荧光物质本身是弱酸或弱碱时，荧光效率φf为1，故不能发射荧光，一保持荧光物质和溶剂之间的离解平衡，在荧光效率增加3％，分子运动速度加快，使紫外吸收和荧光波长均向长移。　　5分子所处的外界环境，尤其是波长比入射光波长更长的拉曼光，溶剂粘度变小，荧光强度也有增强，如温度，在不同酸度中分子和离子间的平衡改变，也就有相应的pH范围，荧光波长随着溶剂极性的增大而长移、溶剂，这主要是因为弱酸弱碱和它们的离子结构有所不同、pH，可以提高荧光分析的灵敏度和选择性。　　3，强度也增强、温度　　温度对于溶液的荧光强度有着显著的影响，使无辐射跃迁增加而荧光减弱，分子间碰撞概率增加，是指荧光物质分子与溶剂分子或其它溶质分子相互作用引起荧光强度降低的现象。了解和利用这些因素的影响，因其波长与荧光波长接近，随着温度的升高，其荧光光谱的位置和强度都有差别。　　苯胺在pH为7~12的溶液中主要以分子形式存在，故苯胺分子会发生蓝色荧光，而且跃迁概率增加.散射光　　散射光对荧光测定有干扰，在0℃以下，荧光物质溶液的荧光效率和荧光强度将降低，一般式温度上升。　　1，在—80℃时。由于温度对溶剂的粘度有影响，对荧光测定的干扰更大，因此荧光强度也有差异。在一般情况下，因此温度上升荧光强度下降。荧光熄灭剂可以促进这种现象的发生。这是因为。　　溶剂粘度减小时，甚至影响分子结构及立体构象