能不能用电泳的方法分离核酸,为什么3
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发布时间:2023-10-24 06:17
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时间:2024-12-04 06:06
① 电泳分离4种核苷酸时应取pH3.5 的缓冲液,在该pH时,这4种单核苷酸之间所带负电荷差异较大,它们都向正极移动,但移动的速度不同,依次为:UMP>GMP>AMP>CMP;
② 应取pH8.0,这样可使核苷酸带较多负电荷,利于吸附于阴离子交换树脂柱。虽然pH 11.4时核苷酸带有更多的负电荷,但pH过高对分离不利。
③ 当不考虑树脂的非极性吸附时,根据核苷酸负电荷的多少来决定洗脱速度,则洗脱顺序为CMP>AMP> GMP > UMP,但实际上核苷酸和聚苯乙烯阴离子交换树脂之间存在着非极性吸附,嘌呤碱基的非极性吸附是嘧啶碱基的3倍。静电吸附与非极性吸附共同作用的结果使洗脱顺序为:CMP> AMP > UMP >GMP。
能不能用电泳的方法分离核酸,为什么
① 电泳分离4种核苷酸时应取pH3.5 的缓冲液,在该pH时,这4种单核苷酸之间所带负电荷差异较大,它们都向正极移动,但移动的速度不同,依次为:UMP>GMP>AMP>CMP;② 应取pH8.0,这样可使核苷酸带较多负电荷,利于吸附于阴离子交换树脂柱。虽然pH 11.4时核苷酸带有更多的负电荷,但pH过高对分离...
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为什么PH3.5时进行电泳分离核苷酸效果最好
因为3.5的时候,磷酸集团全部都解离了,而碱基也不至于因被质子化而带电荷。此时聚核苷酸每1个核苷酸参基带一个负电荷,电荷/质量比相同,其迁移速率仅同受到凝胶的阻力有关。(只有对电荷/质量比相同的分子,其迁移速率才仅同受到凝胶的阻力有关)分子量(聚合度)越大,阻力越大,电泳迁移速率越慢...
用什么技术可以将不同分子量大小的蛋白质或核酸分离开来?
2、电泳法:蛋白质分子在高于或低于其pI的溶液中带净的负或正电荷,因此在电场中可以移动.电泳迁移率的大小主要取决于蛋白质分子所带电荷量以及分子大小.3、透析法:利用透析袋膜的超滤性质,可将大分子物质与小分子物质分离开.4、层析法:利用混合物中各组分理化性质的差异,在相互接触的两相(固定相与...
基础实验技能——核酸电泳
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是否能用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行核酸分子的检测?
当然可以。检测核酸的凝胶主要有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。二者区别在于琼脂糖胶分辨率低一些,用来检测区别较大的核酸分子。而聚丙烯酰胺电泳分辨率高,可区分几十个碱基的差异,所以被用来检测差异不大的核酸分子。