流式细胞仪 荧光染料的特点和选择的基本原则有哪些

流式配色遵循以下基本规则：强弱搭配 选择干扰少的荧光组合 使分析的复杂程度降到最低 谨慎使用串联染料 注意环境因素对荧光素的影响 我们要如何理解这段话呢？“ 强弱搭配 ”， 指的是目标Marker表达量和荧光素的强度要做到强弱搭配， 如果出现强强搭配时，强荧光对弱荧光有干扰的话，那么弱弱组合就像...

荧光法溶解氧是一种先进的水质监测技术，它基于荧光猝熄原理。在蓝光照射下，荧光物质被激发并发射红光，而氧分子能猝熄这种荧光，因此红光的强度与氧分子浓度成反比。通过测量这种荧光信号的变化，我们可以精确计算出水中的溶解氧浓度。天健创新（北京）监测仪表股份有限公司的荧光法溶解氧仪，具有高精度、稳定性强、维护成本低等优点，广泛应用于水处理、环境监测和工业过程控制等领域，为水质安全和环境保护提供了可靠的技术支持。天健创新监测仪表股份有限公司（股票代码：430641）创立于 2002 年，是长期专注于水系统传感器和监测仪表研发、生产、销售的国家高新技术企业。致力于通过水质传感器和数据服务，为水行业提供先进实用的监测解决方案。主要产品包括：悬浮物、浊...

2. Alexa Fluor 488: 与FITC相似，但具有更出色的光稳定性，尤其适合荧光显微镜，且在宽PH值范围内表现稳定。同样适用于488nm激光器的流式细胞仪，FL1通道检测。3. Cy3: 激发和发射波长分别在488nm和570nm，适用于FL2通道。由于是小分子染料，对于流式细胞术有特别优势，但荧光强度低于PE。4. Cy5...

需根据流式细胞仪的通道确认可选择的荧光素，以避免荧光干扰。确认荧光素信息，包括激发波长、发射波长及对应滤光片，与流式细胞仪通道是否一致。第四步，了解荧光素的强度。根据Marker强弱与流式细胞仪可检测荧光素强度，遵循强弱搭配原则进行配色。强表达抗原可选择弱或强荧光素，弱表达抗原必须选择强荧光...

绿色和黄绿色激光器的荧光染料 532 561 nm 激发。用于配有合适的滤光片通道的流式细胞仪光耐受强并且不依赖于PH值，是荧光显微镜技术的最佳选择 蓝光激光器荧光染料 488 nm 激发。适用于荧光显微镜技术。红光激光器荧光染料 633 nm 激发。适用于配备氦氖激光器或红色二极管激光器的流式细胞仪。

在流式免疫技术中，对荧光染料的使用不同于其他标记染色，适用的荧光染料需具备以下几个条件：荧光染料应有较高的量子产额和消光系数；荧光染料对488nm的激发光波长有较强的吸收；发射光与激发光波长之间应有较大的波长差；容易与被标记的单克隆抗体结合而不影响抗体自身的特异性。最常用的染料有FITC、...

（1）直接染色：细胞直接结合标记好荧光染料的抗体。（2）间接染色：一抗与细胞结合后，再与带荧光标记的二抗结合。1.5.3流式细胞仪上机检测及数据分析 1.6常见问题回答 如何选择合适的荧光抗体？直接标记的抗体能减少实验步骤和清洗次数，提高实验的真实性和准确性。实验过程中是否需要设置同型对照？同...

流式细胞仪可同时进行多参数测量，信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号。测量是在测量区进行的，所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点。液流中央的单个细胞通过测量区时，受到激光照射会向立体角为2π的整个空间散射光线，散射光的波长和入射光的波长相同。散射光的强度及其空间...

此外，流式细胞术中常用荧光染料包括FITC、PE、APC、V5、Cyanine等。细胞大小、细胞颗粒度、细胞表面分子、细胞浆内分子、细胞核内分子、细胞功能检测等是流式细胞术的应用范围。通过流式细胞术，研究人员可以深入理解细胞的生物学特性，实现细胞的分选与纯化，为生命科学、医学研究提供强大的技术支持。

选择合适的抗体 通用原则是：为表达最弱的抗原选择染色指数最高的荧光素。根据使用的流式细胞仪性能、激光器、滤光片种类来选择。对于多色实验，需选择发射光谱重叠小的染料。2、参数设定 数据的获取必须是在仪器性能的校准均合格的基础上进行。仪器散射光和荧光信号的光电倍增管电压、增益、颜色补偿等...

流式细胞仪是一种精密的生物分析工具，其工作原理主要基于光散射和荧光信号。当激光束照射通过液流中的单个细胞时，细胞会散射光线，散射光的强度和分布与细胞的大小、形态、质膜结构以及内部结构紧密相关。通过测量前向角散射（FSC）和侧向散射（SSC）信号，科学家可以分别获取细胞尺寸和内部颗粒性质的信息...