生物为什么斐林试剂要现配现用,双缩脲试剂却不用,两者成分不是一样...

发布网友发布时间：2022-05-01 16:26

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热心网友时间：2022-06-21 22:02

斐林试剂和双缩脲试剂都由naoh溶液和cuso4溶液组成，但二者有如下三点不同：
（1）溶液浓度不同：斐林试剂中naoh溶液称为斐林试剂甲，其浓度为0.1g/ml,cuso4溶液称为斐林试剂乙，其浓度为0.05g/ml；双缩脲试剂中naoh溶液（双缩脲试剂a）的浓度为0.1g/ml，cuso4溶液（双缩脲试剂b）的浓度为0.01g/ml。
（2）使用原理不同：斐林试剂是新配制的cu(oh)2溶液，它在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的cu2o沉淀，可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）。
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的cu2+与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲（h2noc-nh-conh2）结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应，可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。
（3）使用方法不同
：斐林试剂使用时，先将
naoh溶液和cuso4溶液混合（将4～5滴cuso4溶液滴入2mlnaoh溶液中），而后立即使用：双缩脲试剂使用时，先加入naoh溶液（2ml），振荡摇匀，造成碱性的反应环境，然后再加入3~4滴cuso4溶液，振荡摇匀后观察现象。