生物问题(2)里为什么是协助扩散
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发布时间:2023-11-22 22:30
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时间:2024-11-09 18:49
生物问题(2)里为什么是协助扩散
做过点突变的亲,质粒中目的片段的点突变引物设计问题
质粒和PCR产物需要拿去测序有2个目的,一是验证插入序列的DNA序列是否无误。第二是看插入的方向和位置是否正确。如果做定量PCR用到质粒的话,一般是用来做标准曲线的。 聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DN*段的分子生物学技术,它可看。
所设计的寡核苷酸引物在所扩增的目的片段一端引入点突变,PCR扩增后获得两条PCR产物,先将两条均含有突变的片段退火形成新的模板,然后由互补的引物引导延伸合成含有突变位点的全长片段。
对于单点突变,Stratagene公司的QuikChangeSite—DirectedMutagenesisKit是不错的选择。通过巧妙设计,将质粒定点突变技术变得简单有效。准备突变的质粒必须是从常规大肠杆菌中经纯化试剂盒(Miniprep)或者氯化铯纯化抽提的质粒。