胶质细胞生长因子有关报道
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发布时间:2024-07-13 01:17
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时间:2024-07-21 04:50
在【中国组织工程研究与临床康复2005年卷】中,魏梅洋、董艳、李家顺、贾连顺和薛亚军等人进行了一项研究,目标是构建胶质细胞生长因子2(GGF2)的真核表达载体pEGFP-N1-GGF2,并观察其在大鼠脊髓内的表达情况。研究于2004年10月在解放军第二军医大学长征医院神经外科实验室展开。
实验使用了出生1周的SD大鼠2只和250-300g的雄性成年SD大鼠12只,将大鼠分为对照组和实验组,每组各6只。研究者首先通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)从大鼠胎脑组织的总RNA中扩增出GGF2的全序列cDNA。然后,他们将该cDNA融合到真核表达载体pEGFP-N1中,构建出重组质粒pEGFP-N1-GGF2。实验组使用阳离子脂质体Transfectam和pEGFP-N1-GGF2混合物进行基因注射,而对照组只注射脂质体和空白质粒pEGFP-N1的混合物。
基因注射一周后,实验组的大鼠进行RT-PCR和荧光摄影观察,结果显示实验组的胶质细胞中GGF2 mRNA表达显著增加,且在局部脊髓内,灰质和白质神经细胞内观察到了较多的绿色荧光蛋白(GFP)表达。对照组则未检测到荧光蛋白表达,证明了pEGFP-N1-GGF2成功实现了在大鼠脊髓内的基因体内转染。