牛奶封闭液颜色变浅
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发布时间:2024-07-11 09:43
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时间:2024-07-11 14:45
1、封闭液的选用要求
1)常用封闭液为脱脂牛奶(光明或伊利等)、牛血清白蛋白(BSA)、无蛋白封闭液等
2) 封闭液浓度:封闭时一般用5%脱脂牛奶,也可用1-5%BSA或1%无蛋白封闭液;配制二抗稀释液一般为1-5%脱脂牛奶,全部用PBS稀释
3) 封闭时间:室温1-2h、4度过夜或37度半小时
4) 封闭液pH:一般5%脱脂牛奶pH大约为6.0-6.5左右,而1%脱脂牛奶可能6.5-7,好像RD公司的WB-Protocol中要求封闭液和稀释抗体的封闭液需要调pH至7.4;但是大多数抗体不调pH也可以做出来
5) 个人经验:5%脱脂牛奶封闭效果最佳,但有时也可能封闭过度,可以与BSA或无蛋白封闭液轮流更换