TBST、 PBST和RIPA的区别是什么?
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发布时间:2024-07-03 05:09
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时间:2024-07-08 22:40
实验助手:探索洗涤缓冲液家族(上)——TBST、PBST与RIPA的秘密配方
在生物实验中,精确的洗涤缓冲液是保证实验准确性和结果清晰的关键。让我们一起深入解析三种常用洗涤液:TBST、PBST和RIPA,了解它们的组成、配置方法以及最佳使用实践。
1、TBST——多用途洗涤大师
TBST,即Tris-Borate-Sodium Tween-20缓冲液,是免疫印迹等实验的常客。它的配方(1X浓度)包括:1L的10X PBS缓冲液(1.37 M NaCl, 27 mM KCl, 100 mM Tris, pH 7.4),加入0.1%的Tween-20(1 mL/L PBS),再补足至1L以获得最终浓度。配置步骤如下:首先,用蒸馏水稀释10X PBS至1X,再加入Tween-20,混合均匀后过滤或离心去杂质。最后,分装到无菌瓶中,存放在4℃的阴凉处,避免反复冻融。
2、PBST——免疫印迹的好帮手
PBST则以磷酸盐缓冲液为基础,加入NaCl和 Tween-20,为免疫印迹实验提供高效清洗。配方为10X PBS(1.37 M NaCl, 27 mM KCl, 100 mM Na2HPO4, 18 mM KH2PO4, pH 7.4)稀释至1X,再加0.1% Tween-20。与TBST相似,配制后过滤,分装并保存在适宜条件下。
3、RIPA——细胞裂解液的秘密武器
RIPA缓冲液,专为提取细胞和组织中的蛋白质而设计。它的配方包括水、10x缓冲盐溶液、脱氧胆酸钠盐、非离子性脱氧胆酸、磷酸二氢钠、乙二胺四乙酸和酸化酚。配置时,先将水与缓冲盐溶液混合,再依次加入其他成分,确保溶解均匀,最后调整pH值为7.4。RIPA对提取过程中蛋白结构的保护至关重要。
每种洗涤缓冲液都有其特定的用途和要求,正确使用它们可以提升实验效率,确保数据的准确性和可靠性。在实际操作中,记得遵循配制步骤,妥善保存,以充分发挥它们在实验中的作用。
TBST、 PBST、 RIPA有啥区别?
PBST则以磷酸盐缓冲液为基础,加入NaCl和 Tween-20,为免疫印迹实验提供高效清洗。配方为10X PBS(1.37 M NaCl, 27 mM KCl, 100 mM Na2HPO4, 18 mM KH2PO4, pH 7.4)稀释至1X,再加0.1% Tween-20。与TBST相似,配制后过滤,分装并保存在适宜条件下。3、RIPA——细胞裂解液的秘密武器 RIP...
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简述tbst与pbst的区别及配置
tbst与pbst的区别:1、TBST的pH值随温度变化大一点,而PBST似乎容易有沉淀,若稀释抗体后需要反复使用的话建议使用TBST溶解。2、两种洗液用起来没有什么区别,都是提供一个缓冲的PH值环境,加上吐温20有助于蛋白的洗脱。PBST的磷酸盐缓冲液加Tween-20,而TBST是Tris缓冲液加Tween-20。PBS溶液是指磷酸缓...
简述tbst与pbst的区别及配置
TBST与PBST是两种常用的生物实验缓冲溶液,它们在成分和用途上有所不同。以下是详细的区别和配置方法:1. **成分区别**:- PBST是磷酸盐缓冲液(PBS)中加入了非离子型表面活性剂Tween-20。- TBST则是Tris-HCl缓冲液中加入了Tween-20。2. **用途区别**:- PBST常用于免疫染色和蛋白质电泳转移等...
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TBST与PBST是两种常用的生物实验缓冲溶液,它们在成分和用途上有所不同。以下是详细的区别和配置方法:1. **成分区别**:- PBST是磷酸盐缓冲液(PBS)中加入了Tween-20。- TBST是Tris-HCl缓冲液中加入了Tween-20。2. **用途和性能**:- PBST通常用于洗涤细胞和制备细胞膜,它的pH值稳定,但可能...
PBST是什么?有什么作用?
TBST和PBST的主要区别在于缓冲液的成分,TBST使用tris缓冲液,而PBST使用磷酸缓冲液。两者都提供了一个稳定的pH环境并含有TWEEN-20来帮助蛋白的洗脱,但TBST更适用于需要保持蛋白原有磷酸化状态的实验,而PBST在不考虑磷酸化影响的常规实验中可以使用,两者在实际应用中根据研究目的来选择。蛋白质磷酸化是一...
PBST是什么?有什么作用?
3. PBST和TBST(Tris缓冲盐溶液加上Tween-20)都是常用的洗涤缓冲液,它们的区别在于缓冲液的组成。PBST含有磷酸基团,而TBST含有Tris基团。选择哪种缓冲液取决于实验目的,例如,如果研究的是磷酸化酶的活性,可能需要使用TBST以避免PBST中的磷酸基团对酶的抑制作用。4. 蛋白质磷酸化是一种重要的生物...
PBST是什么?有什么作用?
在做磷酸化蛋白的wb时是不能使用pbst的,原因很简单,pbst中也有磷酸基团。两种洗液我都用,用起来没有什么区别,都是提供一个缓冲的ph值环境,加上吐温20有助于蛋白的洗脱。pbst的磷酸缓冲液加tween-20,而tbst是tris缓冲液加tween-20,具体用哪种得看你所研究的是蛋白的哪种功能,如研究某种酶的...
TBST是什么?
TBST中含有 Tris-Hcl, NaCl,tween20 这三种物质,是做WESTERN BLOT中常用的一种缓冲溶液。TBST是TBS+Tween的缩写,TBS是Tris-HCl缓冲盐溶液,为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液用1N HC1调pH至7.4,Tween为一种非离子型去污剂,有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力。
在western中是不是所有的tbst都可以用pbst替换?
在western实验中,PBST与TBST都是常用的洗膜缓冲液。PBST是基于PBS的缓冲液,额外添加了Tween 20,这是一种非离子型去污剂。Tween 20的加入有助于洗去与膜非特异性结合的抗体,提升实验结果的特异性。在保存抗体时,通常采用高浓度于甘油中,需要稀释使用。此时,TBST与TBS均可作为稀释液,用于抗体的...