科普|核酸扩增试剂常用酶
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发布时间:2024-05-14 07:48
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热心网友
时间:2024-05-28 14:16
在核酸扩增试剂的世界里,酶的角色无可替代,它们不仅决定了成本效益,还影响着国产企业的技术实力。让我们深入探讨几种关键的酶及其独特之处:
PCR的灵魂:尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)和Taq DNA聚合酶
UDG,作为PCR的守护者,普通型和热敏型的选择,能有效防止扩增子污染,确保实验的精确性。
Taq DNA聚合酶,以其热稳定性著名,常用于热启动PCR,它的化学修饰、抗体修饰和配体修饰版本,提升了复制的高保真度和效率。
逆转录酶:M-MLV与RPA的革新
M-MLV逆转录酶因其低或无RNase H活性,为cDNA合成提供了高效路径。
LAMP、TMA、RT-RPA等技术中,Bst DNA聚合酶的链置换功能,以及T7 RNA聚合酶和重组酶等,展示了在低温扩增领域的独特优势。
专精与创新:Pfu DNA聚合酶与双功能酶
Pfu DNA聚合酶以高保真复制著称,尤其在克隆PCR和基因突变分析中大显身手。
一些酶如RevTaq RT-PCR DNA聚合酶,通过人工改造,实现了逆转录和PCR的同步进行,简化了“zero-step” RT-PCR过程。
Bst 3.0 DNA聚合酶,优化了RT-LAMP反应,逆转录活性增强,为等温扩增开辟了新道路。
值得注意的是,RNA模板扩增过程中,逆转录酶是必不可少的,而双功能酶尽管潜力巨大,但其应用仍需谨慎。多酶系统的成本和复杂性不容忽视,而人工改造酶的出现,无疑为行业发展带来了创新的火花。
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