...杆菌感受态转化,培养后不管阴性阳性都长菌的原因除了抗生素失效还有...
发布网友
发布时间：2024-07-02 23:08
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热心网友
时间：2024-08-03 14:33
如果是药敏试验，很可能是耐药或药的浓度不够，您的题问有点不太懂，我的回答请参考。
热心网友
时间：2024-08-03 14:37
你的阴阳性是不是通过PCR来判定的？如果是的话，那也可能存在带有抗生素抗性的空质粒转入的情况。所以为什么挑菌的时候多挑几个，就是这个原因。
热心网友
时间：2024-08-03 14:35
我也是这种情况，我加的是红霉素，不知道你加的是什么抗生素，交流一下，
转化后涂布,阴性对照培养皿上长有一两个菌落,能否继续在阳性平皿上...
阴性平板上长几个克隆一般的原因是抗性板是筛选压力稍有不足。出现这种情况的原因可能是抗生素母液部分失效或者到平板时加抗生素时培养基的温度过高。你可以用新鲜的抗生素母液重新配置抗性板，如果还出现这种情况，还有可能是感受态细胞的问题。如果阳性实验平板上长的克隆比较多，可以继续挑单克隆摇菌做进一步...
大肠杆菌感受态制备时为什么用无抗性的培养基?
因为感受态细胞本来就不具备抗性。后期用载体质粒转化感受态细胞时，我们就是根据 转化成功的大肠杆菌（载体质粒进入该感受态细胞）能在含抗生素的培养基上生长 而转化不成功（载体质粒没有进入感受态细胞）的感受态细胞则由于没有抗性而不能生长 这一原理来判断是否转化成功。
感受态细胞阴性对照中长菌的原因
培养中细胞长菌，通常是因为你的操作问题，也就是说如果在保证培养材料，器材等外界条件无菌状态下，基本上由于操作过程中带入。建议改进操作手法！如果实在不行，可以考虑在培养基中添加抗生素。
求问:感受态大肠杆菌失效后还能在无抗生素的培养基上生长吗?
一般是可以的，感受态失效后转化率特别低或者无法转化！如果你这种失效是死亡了话，拿肯定不能张了！
...转化大肠杆菌感受态细胞再热激以后进行活化培养,这时培养基为什么不...
因为这时候抗抗生素的基因还没有表达出产物，加入抗生素会把细胞杀死。不过青霉素是个例外，因为青霉素只是阻止细菌细胞壁的合成，而不是直接杀死细胞，所以它只是抑制增殖，细胞还可以存活，然后表达抗青霉素基因，然后就能进行正常的增殖了。
大肠杆菌感受态制备及转化中对照组的意义
对照组的意义在于证明没有转化过质粒的大肠杆菌不具有抗药性，从而说明已导入含抗性基因质粒的大肠杆菌若在含抗生素的培养基生长则证明转化成功。
质粒转化农杆菌感受态后,挑斑摇菌菌液PCR后无条带。
质粒转化应该比较容易，要检查一下引物对不对。其次是你的模板够不够，因为农杆菌中质粒拷贝数很低。可以提出质粒后再来PCR
冻融法制备农杆菌感受态细胞,并且转化质粒相关问题。
还有一种可能就是你的板子上的抗生素浓度不够，导致长出了菌，这个菌到底含不含有你的目的质粒，要做PCR鉴定，不要光看菌落长出与否。建议你把板子的抗生素浓度提高，同时看看未转化质粒的感受态细胞在同样的LB上涂板也长出的单菌落的PCR鉴定结果，从而判断是否仅仅是感受态被质粒污染了 ...
重组质粒转化后长不出来
重组质粒转化后长不出来原因如下：1、重组质粒转化后感受态存放时间过长导致细菌活力很低。2、重组质粒转化后感受态效率太低质粒没有转进感受态细胞中使大肠杆菌在筛选平板上不能生长。3、所转化的重组质粒对大肠杆菌生长有影响造成生长缓慢。4、筛选平板用错了或抗生素加错了都会造成不成功。
大肠杆菌转化失败的原因
要是质粒太多，则会出现很多空质粒，最终转化后依然会长出菌落，但菌落却不含目的DNA，可以通过蓝白斑筛选排除含有空质粒的菌落；连接时质粒太少，连接产物将会产生很多线性、不同长度、不含质粒的产物，产物无法在大肠杆菌内正常表达和复制，自然也就无法为大肠杆菌提供抗生素抗性。
