为什么双酶切后有2条带

3正常情况下可以显现出大小不等的两条带，双酶切将整个环状DNA切成两个片段。4可能其中一个酶质粒上有2个酶切位点，或是因为酶切不彻底，部分质粒没有被双酶切（大片段，小片段，和单酶切得出的片段，因片段大小不一呈现出三条带）。5质粒上有多个关于这两个酶的酶切位点，即酶切不专一，从而...

如果是pcr产物酶切出现了两条极近的带，那么很有可能是因为pcr产物纯化时有杂带污染，一开始跑胶的时候看不出来，后来你回收浓缩再加上酶切，再跑电泳的时候就出现了两条极近的带。其实将这两条带回收（上面那条是目的条带的可能性要大些），进行连接，只要操作和实验条件好的话，菌落的阳性率也...

如果是单酶切，超螺旋质粒会变成开链DNA，开链的DNA在凝胶中泳动速度慢于超螺旋质粒，因此条带会偏大，这是酶切充分的情况。如果不充分，就会有大小有差距的几条带；如果是双酶切，而且片段大小适中，可以看见酶切的片段和载体，还有未切开的质粒。能不能区分超螺旋质粒和开链质粒，和所用琼脂糖凝...

跑的这么虚。。。切出去的条带有多大 胶上看不到 是太小了么 倒未必没有切开 你这质粒亮度上看量挺大的 也会会往下沉一点 所以对比旁边的会更低一些 跑个对照组一般是假如出现没完全切开 有多条带的时候可以对比下知道回收哪条带 像你这只剩一条带了倒是可以回收了继续做后面的试试 ...

2. 单酶切与双酶切：单酶切应该产生一条与未酶切质粒大小一致的线性DNA条带。双酶切则可能产生两条或多条条带，取决于两个酶的酶切位点在质粒上的位置和数量。3. 条带数量：如果电泳后出现多条带，可能是因为质粒上存在多个酶切位点，或者酶切不专一，导致多个片段的产生。4. 条带清晰度：条...

应该是两条挨得很近的条带。可能是pcr回收产物有杂带污染，跑pcr产物的时候没有分开，然后回收纯化以后，再跑就分开了。这个酶切之后跑电泳也是两条带。双酶切的话，没关系的，照样回收照样连，照样出结果。

现象的话你通过跑一个琼脂糖凝胶电泳就能看出来，空载质粒完全切割的话应该只有一条带，没切开的话会有2-3条带，而且位置比较高。 如果是连入了目的片段的载体，那么完全切割只有两条带。未完全切割的话会有3-4条带左右。产生原因很多：1.可能是酶切的时间不够。2.可能是你用双酶切的时候buffer的...

这主要要看你质粒的原始状态。质粒可有闭合环状、开环和线状2种。如果是闭合的质粒，则2酶切位点都酶切后，电泳是2条带；如果是线状的质粒，则是3条带。

双酶切一般会有3条带，而且正确现象应只有一个是非常亮的。因为两种酶识别两个位点切开，无论是质粒还是目的片段两端的粘性末端完全不同，还是拼图，内容不同，两端切合口也不同，除了一种连接方式外没有其他连接了。胶途中3条带分别为：目的片段条带，空质粒条带，最亮的重组质粒条带。

酶切前,质粒电泳图一般是三条条带,并认为这三条带从上到下一次是线性、开环、超螺旋.其实可能会比这条带更多些,可以认为是中间复合体状态. 酶切后,因为超螺旋状态的质粒被切成线性,所以条带会有一条条带.如果是双酶切,或是质粒上的酶切位点比较多的话,会有两条或更多条带.