微孔板夹心杂交法优缺点

1、优点。微孔板夹心杂交法操作简便、快速，避免了同位素标记探针的危害。2、缺点。微孔板只适于常规的ELISA计数仪检测PCR反应的产物，适用范围小。夹心杂交法可用滤膜和小珠固定吸附探针，使用小珠可更好地进行标准化试验和更容易对小量样品进行操作。

⒉化学蚀刻，要求大批量，面积小，面料要薄，材料受限制太高。⒊机械冲压，最大的难题就是冲压模具的技术要求高。加之中国冲孔技术起步 比较晚，技术有待提高，所以，能够冲制微孔板的专业单位还不够多。

此法的敏感性和特异性与PCR32P探针的Southern杂交法相当。但PCR微孔板夹心杂交法操作简便、快速、避免了同位素标记探针的危害,显色反应类似于临床常规应用的ELISA,适于临床实验室常规应用。(四)PCR-ELISA法本法避免了电泳和杂交的步骤,适于常规ELISA记数仪检测。因为5'端修饰后仍可进行常规PCR扩增特异靶序列。因此,可以...

ELISA夹心法是常用的一种测定方法，它基于双抗体夹心原理。通过小鼠抗体的二抗包被微孔板，与单克隆抗体进行结合，然后加入HRP标记的抗小鼠Ig类、亚类抗体进行反应。显色后，通过TMB底物系统和酶标仪测定吸光度，判断单克隆抗体的类别或亚型。该试剂盒具有高分辨率，是鉴定小鼠单克隆抗体类和亚类的可靠工具。

这个过程的优势在于，未结合的链可以方便地通过漂洗去除，膜上留下的杂交产物易于检测，并能避免靶DNA自我复性的问题。常见的固相杂交技术有菌落原位杂交、斑点杂交、狭缝杂交、Southern印迹杂交、Northern印迹杂交、组织原位杂交以及夹心杂交等，这些在实际应用中非常普遍。相比之下，液相杂交则是在溶液中进行的...

（1）固相杂交 将参加反应的一条核酸链先固定在固体支持物上，一条反应核酸游离在溶液中。固体支持物有硝酸纤维素滤膜、尼龙膜、乳胶颗粒、磁珠和微孔板等。由于固相杂交后，未杂交的游离片段可容易地漂洗除去，膜上留下的杂交物容易检测和能防止靶DNA自我复性等优点，所以最为常用。常用的固相杂交类型有...

操作简便、快速，但使用范围小。1、优点。微孔板夹心杂交法操作简便、快速，避免了同位素标记探针的危害。2、缺点。微孔板只适于常规的ELISA计数仪检测PCR反应的产物，适用范围小。夹心杂交法可用滤膜和小珠固定吸附探针，使用小珠可更好地进行标准化试验和更容易对小量样品进行操作。

但是,由于同位素不稳定和放射性危害,不能常规用于临床或法医检验,用非放射性物质(生物素、荧光素和地高辛等)标记的寡核苷酸探针分析PCR产物以确定核酸序列变异则是一种简便而安全的方法。非放射性标记物质稳定性高,使用方便、安全、检测速度快。 (三)微孔板夹心杂交法 该法是通过一固定于微孔板的捕获探针与PCR产物...

固体支援物有硝酸纤维素滤膜、尼龙膜、乳胶颗粒、磁珠和微孔板等。由于固相杂交后,未杂交的游离片段可容易地漂洗除去,膜上留下的杂交物容易检测和能防止靶DNA自我复性等优点,所以最为常用。常用的固相杂交型别有:菌落原位杂交、斑点杂交、狭缝杂交、Southern印迹杂交、Northern印迹杂交、组织原位杂交和夹心杂交等。 (2...