检测胞内信号蛋白表达量的方法是怎样？

实时荧光定量PCR检测mRNA的表达，然后westernblot检测蛋白表达量。

核酸蛋白用分光光度计？找让奇（上海）仪器科技有限公司 从事紫外可见分光光度计等实验室分析仪器的研发、设计、生产及销售的企业。目前主营产品有：G-9系列双光束扫描型紫外可见分光光度计、D-8系列准双光束扫描型紫外可见分光光度计、D-7比例...

接着，使用Image-Adjust-Threshold设定阈值，选择默认值以减少人为误差。务必确保只选中信号区域，而避开比例尺（可能影响结果）。选择最适合的阈值算法，如Default，但如有需要，可尝试其他方法以优化选择。在Analyze-Set Measurements中，关键在于勾选Mean gray value和Limit to threshold，这将确保测量的是阈值...

1。细胞打散到单细胞的悬液，没有聚团成块。如果有顾虑的话用纱网过滤一次才用。2。细胞悬液的浓度不能过高和过低。详请参考你的仪器说明建议值。我的经验每毫升一百万足足够了。少些读取慢些也没有大问题，一支样品少过十万的话，就很容易得不到足够的数据。太多则读取过快，准确性可能降低，更多...

判断分泌蛋白和胞内蛋白的方法：1、看n端是否有信号肽，有的话就是分泌蛋白，反之是胞内蛋白。2、看位置。分泌蛋白是在内质网上的核糖体上合成的，必须经过内质网，高尔基体加工运输到细胞膜外如抗体胰岛素等。胞内蛋白是在细胞质游离的核糖体上合成的，不需要运输到细胞膜外，只在细胞内起作用如呼吸...

多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器，它只能测量一个细胞的诸如总核酸量，总蛋白量等指标，而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说，它的细节 分辨率为零。流式细胞计可同时进行多参数测量，信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号。测量是在测量区进行的，所谓测量区就是照...

根据检测结果，从而可得知被检生物（植物）细胞内目的蛋白的表达与否、表达量及分子量等情况。Western 杂交技术是一种蛋白质的固定和分析技术，是将已用聚丙烯酰胺凝胶或其它凝胶或电泳分离的蛋白质转移到硝酸纤维滤膜上，固定在滤膜上的蛋白质成分仍保留抗原活性及与其它大分子特异性结合的能力，所以能与...

GFP 绿荧光蛋白(Green Fluorescent Portein，GFP)EGFP，即增强绿色荧光蛋白（Enhanced Green Fluorescent Protein）区别：EGFP是GFP突变系，应用较多的是GFP的突变体：增强型绿色荧光蛋白（EGFP ）（64位苯丙一亮），发射出的荧光强度比GFP大6倍以上。

那么使用原核表达系统就很合适了。有的时候在不同的表达体系里面对蛋白的表达量是有影响的。当构建完成后携带有信号肽的时候，一些蛋白在真核表达体系中表达量极低。去除信号肽序列值后，直接表达成熟肽，表达水平明显提高。所以说构建的真核表达载体高表达mRNA却检测不到目的蛋白是完全有可能的。

关键是这个信号肽原核细胞买不买单。一般认为，还是原核细胞胞内表达居多。如果有原核细胞毒性，表达量可能不高。

是否带电荷带什么电荷等。关于酶活，应该每一步都要测定酶活，可用该酶分解蛋白质的特点，看一定的酶量在单位时间里分解蛋白的量，如果有特殊吸收峰的话可用紫外分光光度计测吸光度。表达量，一般定量表达，常用方法是基因水平Realtime-PCR，蛋白水平，westen-blot法。也可参考其他相关文献的方法。