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真核表达系统(第三弹)—昆虫杆状病毒表达系统

发布网友 发布时间:2024-05-08 13:28

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热心网友 时间:2024-06-08 06:59

探索真核表达的新纪元:昆虫杆状病毒表达系统的深度解析


昆虫杆状病毒表达系统,以其卓越的特性,正在科研领域崭露头角。它以高产量、大容量、搭载强启动子的特性,迅速成为生物技术的首选。最引人注目的是其翻译后修饰的优异表现,以及对宿主安全的保证。尤其对于毒性或癌基因的表达,这种系统提供了更为可靠的选择,因为它不侵犯脊椎动物的生理平衡。


载体家族中,NPV、AcMNPV(常用于实验)以及Bac-to-Bac和MultiBac系统各具特色。Bac-to-Bac系统巧妙运用F 因子原理,借助Bacmid载体,通过多重转座技术实现外源基因的精确整合。而MultiBac则进一步优化了杆状病毒,使之能够高效生产多蛋白复合体,展现出强大的多功能性。


Tn7或Cre酶驱动的MultiBac系统,以质粒的形式存在,特别适用于多基因组装。通过转染,它在基础和应用研究中发挥着重要作用,其设计精巧,目的基因如箭头所示,LoxP作为标记,复制起点则清晰可见。昆虫细胞系,如鳞翅目的Sf9、Sf21、Tn-368和High Five,其中High Five因其高表达量和糖基化修饰能力而备受青睐,特别是SFSWT系列,通过基因工程改造,可实现糖蛋白的唾液酸化。


尽管昆虫杆状病毒系统具有完整蛋白功能、翻译后修饰、高表达量和多基因表达的显著优势,但也存在挑战。外源蛋白的表达受病毒感染过程调控,可能导致后期细胞死亡,这是需要科研人员密切关注的问题。


昆虫杆状病毒表达系统,如同科研界的瑰宝,为生物技术的革新打开了新的可能性。未来,我们将继续深入探讨真核表达系统的优点与不足,以期在分子生物学的舞台上书写更多突破。祝愿每一位实验室的探索者实验顺利,不断取得新的突破。


参考资料:



Vibhor Mishra. "商业 Baculovirus Expression Vector Systems: A Comprehensive Guide", 2019.
张俊. "Bac-to-Bac System for Multidopamine Neurotrophic Factor Expression in sf9 Cells", 2011.
Sari D 等. "Complex Protein Bioproducts via the MultiBac Baculovirus/Insect Cell Expression System", 2016.
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