植物酰基转移酶提取方法
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发布时间:2024-05-09 12:25
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时间:2024-07-25 23:41
1、选择适当的植物材料:根据研究目的,选择含有目标酰基转移酶的植物材料。可以是植物的根、茎、叶、果实等不同部位。
2、破碎植物组织:将植物材料进行机械或化学破碎,以释放细胞内的酶。可以使用研磨器、超声波破碎仪等设备进行破碎。
3、制备粗酶液:将破碎后的植物组织与提取缓冲液混合,通常使用pH和温度适宜的磷酸盐缓冲液。在4℃条件下,用搅拌机搅拌破碎组织,使酶充分溶解。然后通过离心去除不溶性杂质。
4、浓缩酶液:将粗酶液通过超滤或透析等方法进行浓缩,以去除多余的水分和盐分。
5、纯化酶蛋白:采用层析技术对浓缩后的酶液进行纯化。常用的层析方法有离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等。根据目标酶的性质选择合适的层析方法。
6、测定酶活性:将纯化后的酶液进行活性测定,以评估提取和纯化的效果。常用的测定方法有比色法、荧光法等。
7、保存酶液:将纯化后的酶液加入适量的提取缓冲液,分装并密封保存在-80℃冰箱中,避免反复冻融。
植物酰基转移酶提取方法
1、选择适当的植物材料:根据研究目的,选择含有目标酰基转移酶的植物材料。可以是植物的根、茎、叶、果实等不同部位。2、破碎植物组织:将植物材料进行机械或化学破碎,以释放细胞内的酶。可以使用研磨器、超声波破碎仪等设备进行破碎。3、制备粗酶液:将破碎后的植物组织与提取缓冲液混合,通常使用pH和...
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