“限制性内切酶”对基因重组有什么作用?
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发布时间:2024-05-03 21:05
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时间:2024-07-25 06:59
1952年卢瓦和休曼,1953年伯塔尼和韦格尔,都发现微生物中有一种“限制性内切酶”能够将DNA切成小的片段。用同一种限制性内切酶切开的DNA,其末端核苷酸有配对性,能相互辨认和粘连在一起。科学家们一发现这种特点,就立即意识到了它的重要性。他们用限制性内切酶把两份不同的DNA切开,再用DNA连接酶把它们粘合在一起,从而有可能实现人为支配下的基因重新组合。
这个发现毫不含糊地得到了证实。但是有了限制性内切酶和DNA连接酶,还需要有运载工具。科学家发现大肠杆菌内存在着一种叫做质粒的环状体,它们能在大肠杆菌细胞内自由出入,自身能不断繁殖,并随着寄主细胞的分裂而被遗传下去。
1973年,美国科学家科恩和博耶用限制内切酶这把化学“手术刀”,把金黄色葡萄球菌携带的抗四环素基因切下来,同时也把质粒的DNA切开,再用DNA连接酶把两个接口封住,这样便重组了一个带抗四环素基因的大肠杆菌质粒DNA。这个质粒和原来的质粒不同,所以叫做重组质粒。然后让这个重组质粒再回到大肠杆菌里去,并在大肠杆菌内“定居”下来,它随着大肠杆菌“一股劲地繁殖”,并表现出抗四环素的特性。
这个实验说明,人们可以把甲种生物的遗传物质转移到乙种生物中去,而接受了转移遗传物质的乙种生物,能把甲种生物的特性表现出来,并且一代代地传下去。这个实验标志着一个十分重要的学科基因工程的到来。
“限制性内切酶”对基因重组有什么作用?
他们用限制性内切酶把两份不同的DNA切开,再用DNA连接酶把它们粘合在一起,从而有可能实现人为支配下的基因重新组合。这个发现毫不含糊地得到了证实。但是有了限制性内切酶和DNA连接酶,还需要有运载工具。科学家发现大肠杆菌内存在着一种叫做质粒的环状体,它们能在大肠杆菌细胞内自由出入,自身能不断繁殖...
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“限制性内切酶”对基因重组有什么作用?
他们用限制性内切酶把两份不同的DNA切开,再用DNA连接酶把它们粘合在一起,从而有可能实现人为支配下的基因重新组合。这个发现毫不含糊地得到了证实。但是有了限制性内切酶和DNA连接酶,还需要有运载工具。科学家发现大肠杆菌内存在着一种叫做质粒的环状体,它们能在大肠杆菌细胞内自由出入,自身能不断繁殖...
基因重组技术中,切割dna用什么酶
重组技术中,切割dna是用限制内切核酸酶。重组指在生物体进行有生殖的过程中,控制不同状的重新组合。其发生在二倍体生物的每一个世代中。限制核酸内切酶是可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列,并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶,简称限制酶。
在构建重组dna分子时,限制性核酸内切酶有何作用
答:限制性核酸内切酶的作用是识别并切割特定的DNA核苷酸序列,从而获得重组DNA分子。
重组dna技术中常用的工具酶
DNA连接酶等工具酶。1、限制性核酸内切酶(RestrictionEndonucleases):酶能够识别特定的DNA序列,在该序列上切割DNA分子。起到了“剪刀”的作用,可以产生特定的片段。2、DNA连接酶(DNALigases):酶能够将两个断裂的DNA片段连接起来。通过催化磷高效地将两端相互配对并形成磷铵键,从而恢复完整的连续链。
为什么基因重组不可以少工具酶?
表1 DNA重组技术中最常用的工具酶 酶 主要用途 限制性核酸内切酶 识别DNA特定序列,切断DNA链 DNA聚合酶Ⅰ 或其大片段(Klenow)①缺口平移制作标记DNA探针 ②合成cDNA的第二链 ③填补双链DNA3’凹端 ④DNA序列分析 耐热DNA聚合酶(Taq DNA聚合酶等) 聚合酶链反应(PCR)DNA连接酶 连接两个DNA分子...
胰岛素基因重组于大肠杆菌的注意事项
限制性内切酶、DNA连接酶。1、质粒选择:选择适当的质粒载体,能够确保目的基因的稳定表达和有效复制。2、限制性内切酶:在基因重组过程中,需要使用同种限制性内切酶将质粒切开,以便将目的基因插入质粒中。3、DNA连接酶:使用DNA连接酶将目的基因与质粒“缝合”,形成一个能表达出胰岛素的DNA质粒。
酶切有什么用?
看来你是只知道理论,不知道实验,在基因重组实验中要用限制性内切酶切开载体,同时还要切去外源片段连段的部分碱基,形成粘性末端,与载体连接,通过转化进入感受态细胞,进行表达以及后续工作,这是基因工程的一个重要内容。如果是构建好的载体,通过酶切和琼脂糖凝胶电泳可以验证片段是否连接正确。
有标记基因的质粒在基因重组之后,怎样筛选出导入了目的基因的质粒...
作为骨架的环状质粒经过限制性内切酶的作用被切开成线性的质粒。如果目的基因能够成功插入位点,那么经过链接酶的作用,线性的骨架质粒和你的目的基因又能够成功变成一个环状质粒。环状质粒上的基因能够得到表达,所以能产生对某种抗生素的抗性,而线性的质粒不能。我们可以通过这个了解是否有环状的质粒存在(希望是...
...新教材选择性必修三第73页的思考与讨论中重组DNA分子 EcoRI的切割...
EcoRI是一种限制性内切酶,可以特异性地识别并切割DNA分子中的序列GAATTC。具体而言,EcoRI的切割位点是在GAATTC序列之间的虚拟位置上。在这个位置,EcoRI酶会切割DNA双链,并在5'端和3'端遗留出“黏性末端”(sticky ends),这些黏性末端可以与其他具有相同复合末端的DNA片段进行连接,形成重组DNA分子。...