DNA提取浓度太低有什么影响?
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发布时间：2024-05-02 11:32
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时间：2024-07-24 03:21
1)实验材料量太少，建议适当增加增加样本量；
2)样品裂解不充分。保持样本量不变的情况适当增加裂解液。使用液氮或匀浆器对样品进行研磨和匀浆，使其充分混匀，适当延长裂解时间；
3)提取材料质量不好。保证样品本身DNA含量，尽量选用富含核酸的组织或新鲜组织提取基因组DNA，样品采集后应尽快保存在 -80℃或液氮中，避免样品反复冻融或保存时间过久。若样品DNA含量较少，即使电泳检测不到明显的DNA条带，仍可尝试进行PCR检测，建议使用灵敏度高的酶进行扩增；
4)洗脱条件不合适。用超纯水洗脱前应检查其pH 值是否在7.0-8.5之间，如pH值小于7将明显影响洗脱效率，需调节后进行洗脱；
5)裂解液中加入无水乙醇后有沉淀析出。用移液*吸打几次打散沉淀有利于提高产量。
6）DNA 断裂或降解。避免因移液*反复吹吸或反复冻融样品造成的DNA损伤，及避免在操作过程中带入外源DNase污染
