不同来源的DNA片段重组成新的杂种DNA分子,可能需要哪些酶?其作用原理...

发布网友发布时间：2024-05-30 13:14

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热心网友时间：2024-06-04 08:19

【答案】：限制性内切酶和DNA连接酶。限制性内切酶的作用是把DNA分子切割成小的DNA片段，连接酶的作用是把这些小的DNA片段按照设计的思路连接起来，形成新的重组DNA分子。许多限制酶，在分别切割DNA双链时，都在所生成的DNA片段的两端，各留下一段短的单链末端。如果另一DNA分子也用同一内切酶处理，则所生成的DNA片段将具有相同的单链末端，相互间可互补成为双链。基因工程正是主要根据这一原理实现不同来源DNA的体外重组，将目的基因装配到作为载体的另一DNA分子上去。两个DNA片段的单链末端经过互补形成双链之后，通常还需要用DNA连接酶封闭该单链末端退火，结合出现的缺口。DNA连接酶能够在DNA的5'磷酸末端和3'羟基末端之间形成共价磷酸二酯键。但是，有些限制酶切割DNA的结果并不产生单链末端。在这种情况下，需要用连接力很强的噬菌体T4-DNA连接酶，才能使切开的染色体DNA和载体DNA连接在一起。