如何判断一段基因是否容易表达

判断一段基因是否表达的方法：细胞水平：如果转进去的目的基因带有标记，例如荧光，那么用倒置荧光显微镜就可以看到，有荧光，则基因表达，当然这必须细胞本身没有荧光才行。蛋白水平:将样品收集，裂解，用蛋白免疫印记法（Western Blot）来检测，根据曝光条带判断有无目的蛋白的表达，从而证实基因的表达。分子...

通常来讲,反应体系的引 物终浓度为100-400mM;模板如果是总RNA一般是10ng-500,如果cDNA,通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液,要根据目的基因 的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值,在操作过程中,还需要根据所用MasterMix,模板和引物的不同进行优化,达到一个最佳反应体系。在反应体 系配置过程中,有下面几点需...

1. 首先将上游序列带启动子序列克隆到一些报告基因的载体中，例如luciferase的基因，首先观察构建后，luciferase是否能够表达。然后再通过突变或截短启动子上游的区域，来观察luciferase的表达强弱，以判断是哪一段，甚至是哪几个碱基对下游基因的转录起到调控的作用。用报告基因是比较简单方便的办法。2. 如果...

首先要确认目的基因已经传入受体细胞.然后再检测其表达情况,一般有两种方法：一个是通过特定性状来判断目的基因是否表达,比如导入的目的基因是编码某种酶的,那么最简便有效的方法就是经过表达后检测有没有相应酶的活力,同时跑蛋白胶,看有没有预期的目的条带,因为对于酶来说,有时候目的基因虽然表达了,但是...

用基因敲除，表达，和过表达来验证。先用基因敲除看看，这种代谢产物是否还能表达。还有就是把预测的这个片段导入不能产生这种功能的宿主中去，看看这个被导入的宿主是否也能表达产生这种代谢产物。

方法很多，随便说几个。第一，上ncbi检测有没有同源序列。第二，构建载体，转入过量表达看效果。第三，据此推测出蛋白序列，人工合成看效果。

首先要确认目的基因已经传入受体细胞.然后再检测其表达情况,一般有两种方法：一个是通过特定性状来判断目的基因是否表达,比如导入的目的基因是编码某种酶的,那么最简便有效的方法就是经过表达后检测有没有相应酶的活力,同时跑蛋白胶,看有没有预期的目的条带,因为对于酶来说,有时候目的基因虽然表达了,但是...

1 western bloting a.将编码目标蛋白基因通过载体进行体外重组，然后导入宿主细胞表达 b.将目标蛋白注入兔子或其他动物体内获得一抗 c.将样品蛋白进行聚丙烯酰胺凝胶电泳、转移、吸附固定 d.用一抗与之杂交再用二抗检测其是否表达 2 fluorescent real-time PCR a.提取样品总RNA，再通过超速离心获得mRNA b...

一、外源基因转录水平的鉴定 基因表达分为转录及翻译两阶段，转录是以DNA（基因）为模板生成mRNA的过程，翻译是以mRNA为模板生成蛋白质的过程，检测外源基因的表达就是检测特异mRNA及特异蛋白质的生成。所以基因表达检测分为两个水平。即转录水平上对特异mRNA的检测和翻译水平上对特异蛋白质的检测。转录水平...

如何在转录水平检测某基因的表达1.基因丢失：体细胞分化过程必须将某些基因永久性的关闭,最简单有效的方式就是将其丢失.2.基因扩增：发育分化、环境条件的改变,对某些产物的需要量急剧增加--增加该基因的拷贝数.3、基因重排：某些基因片段改变原来的书顺序重新排列.4、甲基化修饰,脊椎动物,DNA上特定的CpG...