基因工程中是先切质粒还是先切目的基因?

质粒是一个闭合的DNA圆圈,你得先切开它,把它切成一条线；然后你再从一长串DNA上切下你要的目的片段,用连接酶像胶水一样,吧质粒的两端和目的片段的两端连接起来——又成一个圆圈了,但是这次这个DNA圆圈已经含有你要的片段了.由于载体质粒只有圆圈状才有活性,才有用,所以你必须这么做.

质粒是一个闭合的DNA圆圈，你得先切开它，把它切成一条线；然后你再从一长串DNA上切下你要的目的片段，用连接酶像胶水一样，吧质粒的两端和目的片段的两端连接起来——又成一个圆圈了，但是这次这个DNA圆圈已经含有你要的片段了。由于载体质粒只有圆圈状才有活性，才有用，所以你必须这么做。。。

1.提取目的基因:既从人的DNA中提取胰岛素基因,可使用限制性内切酶将目的基因从原DNA中分离.2.提取质粒:使用细胞工程,培养大肠杆菌,从大肠杆菌的细胞质中提取质粒,质粒为环状.3.基因重组:取出目的基因与质粒,先利用同种限制性内切酶将质粒切开,再使用DNA连接酶将目的基因与质粒"缝合",形成一个能表达出胰...

先从目的生物获取目的基因。可以直接PCR或者提取mRNA反转录。当然，有些时候，为了去掉基因内部的酶切位点，此时也可以引入同义突变。然后是连接到质粒中。根据不同的目的选取不同的质粒。随后如果想进行基因突变（特别是改变氨基酸序列的）的话，现在就是最佳的时候。接下来就是将重组的质粒转入表达细胞内...

（1）要把目的基因切下来，就得两端都切一下，用“酶II"切质粒的时候，如果用酶II之后连接进去，目的基因可能会连进多个位点。而且还会出现一大堆复杂的现象，这个先不说。所以切质粒只能用"酶I"（2）要插入载体，自然要用到“连接酶”了 （3）标记基因的作用就是“便于筛选”（4）结构基础是“...

我是一名湖南高三学生，这个刚好学过 切：找到目的基因，也就是那个最终要起作用的的基因，用限制性核酸内切酶将其切取出来，这样基因两头会都有“接口”，“接口有两种：平末端、黏性末端（注意：一种限制性核酸内切酶只可以用来切取一种基因）接：找到载体（如最常用的为　质粒），将其用上面的同种...

2、目的基因与运载体结合。将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。如果以质粒作为运载体，首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。然后用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端（部分限制性内切酶可切割出平末端，拥有相同效果）。3、...

基本的基因工程技术步骤简单来说五个字：切、接、转、增、检。“切”就是将加入酶切位点的外源基因和拥有相同酶切位点的载体进行限制性内切酶酶切反应，克隆质粒可以单酶切也可以双酶切，要是做表达质粒就需要双酶切以确定正确的基因表达方向；“接”就是将前面用内切酶处理后有着相同粘性末端的外源...

（2）目的基因与运载体结合：基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。如果以质粒作为运载体，首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。然后用同一种限制...

先通过双酶切反应酶切空质粒载体和目的基因，再通过酶连反应连接空质粒载体和目的基因，从而构建成完整的重组质粒。此时重组质粒的T-DNA区包括T-DNA边界序列、复制原点、突变启动子片段、GUS报告基因、抗性基因。我们称这段T-DNA区为目的片段。农杆菌转化法的原理是构建双元表达载体系统，由两种质粒组成，...