pCAMBIA 1301这个质粒的启动子35s promter在多克隆酶切位点（MCS)的后面,我该把基因插入到哪个区段？

发布网友发布时间：2022-05-06 04:18

共2个回答

热心网友时间：2023-10-05 02:21

1 不会表达，除非你带上完整的启动子和终止子。35s promter是启动下游Gus基因的，而不是上游的序列。

2 该质粒用来表达你的目的基因时，你必须将完整的基因（启动子+CDS+终止子）一起导入到多克隆位点区；然后转化植物后，你可以通过Gus染色来检测阳性苗。另外你还可以用MCS区的酶切位点加下游的NcoI 或Bgl II双切，将35S启动子置换成你所研究的启动子，这是它主要的用途。追问那如果我的基因没有自带启动子的话，我想用该质粒自带的35s启动子来启动，切掉Gus基因，将它替换成我的目的基因，这样能够表达吗？？？非常感谢这位师兄啊！！！！

追答当然可以，你可以用Nco Ｉ和BstE II 来将你的片段置换上去

热心网友时间：2023-10-05 02:21

一楼正解！！！