...浓度为100μM,做10μl的PCR反应体系,上下游引物各需5pmol,我该怎...
发布网友
发布时间:2024-04-05 15:36
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热心网友
时间:2024-04-09 09:06
以下基于我认为开始的100μM是每一个引物的浓度。
你把每条引物稀释10倍到10μM,然后把上下游引物1:1混合在一起,这样上下游引物最终为5μM。
PCR的时候10μl的体系里面加入1μl之前混合好的引物对溶液即可
这时对于每一条引物最终为5μM x 1μl 就是 (5x10^-6 mol/L) x (1x10^-6L)=5x10^-12mol 即为5pmol
热心网友
时间:2024-04-09 09:12
很简单,看你每对引物最终需要用多少次。针对10次而言,每对引物各取母液(浓度100μM)0.5μl加入到9μl无菌去离子水中,每个PCR反应加1μl混合好的引物。