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核酸序列、高级结构及测序原理

发布网友 发布时间:2022-05-03 00:58

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热心网友 时间:2022-06-28 20:46

你的提问很大,因为核酸包括DNA和RNA,它们的结构各有特点。
如果不是生物专业的话比较难解释。下面简单说说DNA测序原理:
Sanger 法测序的原理就是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成,每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP),并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基团,使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、A、T或C处终止。终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dNTPs和ddNTPs的相对浓度可以调整,使反应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。它们具有共同的起始点,但终止在不同的的核苷酸上,可通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段,凝胶处理后可用X- 光胶片放射自显影或非同位素标记进行检测。
请结合参考网页的图来理解。

参考资料:http://ke.baidu.com/view/1452490.htm

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