甘油保藏菌种实验步骤 甘油保藏菌种原理
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发布时间：2024-01-07 01:29
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时间：2024-03-10 02:58
1、准备工具：准备镊子、EP管、*头等工具，然后用高压灭菌锅进行杀菌。2、消毒处理：用酒精对手掌、镊子进行消毒，然后取出10支EP管放入试剂盒内。3、放入菌种：用移液*取出甘油，放入EP管，然后再将菌种放入管内。4、低温保存：盖好盖子，做好标注，将所有菌种都装到袋中，再将袋子置于冰箱内保存。
一、甘油保藏菌种实验步骤
1、准备工具
准备好镊子、EP管、*头等工具，然后将其放入高压灭菌锅内做杀菌处理。
2、消毒处理
将酒精擦拭在手上进行消毒，并对镊子做消毒处理，再用镊子取出10支EP管并放入试剂盒中。
3、放入菌种
用移液*取出50%的甘油，然后放入EP管中，再取出菌种放入EP管。
4、低温保存
盖上盖子，并做好标注，然后将所有菌种都装到袋子中（袋子也要做好标注），再将袋子放在-20℃的冰箱内保存。
二、甘油保藏菌种原理
1、保藏原理
甘油可以作为菌种的保护剂，低温冷冻的条件下，使微生物的新陈代谢趋于停止，从而达到长期有效的保藏目的（保藏温度越低，效果越好）。
2、注意事项
（1）应使用非选择性的增菌培养基，因为微生物在选择性培养基中生长时可能会丢失某些生物特性，而且保藏的菌种的生物特性可能和标准菌株的特性有所差异。
（2）菌液的浓度越大，菌种的保存时间一般越长。保藏细菌常使用菌液，保藏霉菌常使用无菌水，或用生理盐水制备成的孢子悬液。
（3）甘油的最终浓度为10-20%。甘油原液过于粘稠，需配制适宜的甘油水溶液，将菌悬液和甘油按照1：1的体积比例充分混匀，再分装至经过灭菌处理的保藏管中，放入-80℃（-70℃）的冰箱内保存。
（4）该方法适合中长期菌种保藏，保藏时间通常是2-4年左右。
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