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聚酰胺柱色谱的规律是什么?

发布网友 发布时间:2024-01-23 10:17

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热心网友 时间:2024-04-17 13:27

聚酰胺柱色谱分离黄酮类化合物的规律如下:

分子中酚羟基数目越多则吸附力越强,在色谱柱上越难以被洗脱。

与酚羟基位置有关,如所处位置易于形成分子内氢键,则吸附力减小,在色谱柱上易洗脱。

分子内芳香化程度越高,共轭双键越多,则吸附力越强,在色谱柱上难洗脱。

分离苷与苷元时,若以含水溶剂如甲醇-水洗脱,苷比苷元先洗脱,若以有机溶剂如氯仿-甲醇洗脱,则苷元比苷先洗脱。

聚酰胺(Polyamide)是通过酰胺基聚合而成的一类高分子化合物,层析分离中常用的聚酰胺是由己内酰胺聚合而成的尼龙6和由己二酸和己二胺聚合而成的尼龙66。

聚酰胺分子中含有丰富的酰胺基团,可与酚类、醌类、硝基化合物等形成氢键而被吸附,与不能形成氢键的化合物分离。所以,利用聚酰胺作为层析柱填料,可使一定极性范围的某类物质得以分离精制。

加样

聚酰胺的样品容量较大,一般每100ml聚酰胺粉可上样1.5~2.5g,可根据具体情况适当增加或减少。若利用聚酰胺除去鞣质,样品上柱量可大大增加,通常观察鞣质在柱上形成的橙红色色带的移动,当样品加至该色带移至柱的近底端时,停止加样。

样品常用洗脱剂溶解,浓度在20~30%。不溶样品可用甲醇、乙醇、丙酮、乙醚等易挥发溶剂溶解,拌入聚酰胺干粉中,拌匀后将溶剂减压蒸去,以洗脱剂浸泡装入柱中。

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