生化实验《酵母核糖核酸的分离及组分鉴定》中如何得到高产量RNA粗制品

发布网友发布时间：2022-05-05 01:15

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热心网友时间：2023-10-09 07:18

本实验选用酵母，是因为酵母中RNA含量较多，且价格便宜。

RNA可溶于碱性溶液，所以本实验用0.04mol/LNaOH溶液来提取。

RNA不溶于乙醇，可用酸性乙醇使RNA从溶液中沉淀出来，再用乙醇洗涤沉淀，可得到RNA粗制品。

实验操作如下：

　　将15g酵母悬浮于90 mL 0.04 mol／L氢氧化钠溶液中，并在乳钵中研磨均匀。将悬浮液转移至150毫升锥形瓶中。在沸水浴上加热30分钟后，冷却。离心（3000 r／min）15分钟，将上清液缓缓倾入30 mL酸性乙醇溶液中。注意要一边搅拌一边缓缓倾入。待核糖核酸沉淀完全后，离心（3000 r／min）3分钟。弃去清液。用95％乙醇洗涤沉淀两次，乙醚洗涤沉淀一次后，再用乙醚将沉淀转移至布氏漏斗中抽滤。沉淀可在空气中干燥。

　　取200 mg提取的核酸，加入1.5 mol／L硫酸溶液10 mL，在沸水浴中加热10分钟制成水解液并进行组分的鉴定。

嘌呤碱取水解液1mL加入过量浓氨水，然后加入约1mL0.1mol／L*银溶液，观察有无嘌呤碱的银化合物沉淀。

核糖取1支试管加入水解液1mL、三氯化铁浓盐酸溶液2 mL和苔黑酚乙醇溶液0.2mL。放沸水浴中10分钟。注意溶液是否变成绿色，说明核糖的存在。

磷酸取 1支试管，加入水解液1mL和定磷试剂1mL。在水浴中加热，观察溶液是否变成蓝色，说明磷酸是否存在。

热心网友时间：2023-10-09 07:18

1.本实验选用酵母，是因为酵母中RNA含量较多，且价格便宜。
2.RNA可溶于碱性溶液，所以本实验用0.04mol/LNaOH溶液来提取。
3.RNA不溶于乙醇，可用酸性乙醇使RNA从溶液中沉淀出来，再用乙醇洗涤沉淀，可得到RNA粗制品。