质粒污染的原因有哪些?
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发布时间：2023-12-21 21:50
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热心网友
时间：2024-08-12 18:19
1. 实验室操作不规范：在实验室中，如果操作人员没有严格遵守无菌操作规程，可能会导致细菌、真菌等微生物的污染。此外，如果在提取、纯化质粒的过程中使用了未经消毒的试剂或设备，也可能导致质粒污染。
2. 实验材料受到污染：实验中使用的试剂、培养基、耗材等物品如果没有经过严格的无菌处理，可能会携带有微生物，从而导致质粒污染。
3. 交叉污染：在实验室中，不同实验项目之间可能存在交叉污染的风险。例如，使用同一台离心机进行多个实验项目时，如果没有对离心机进行彻底的清洁和消毒，可能会导致质粒污染。
4. 实验动物携带病原体：在进行动物实验时，如果实验动物携带有病原体，可能会导致质粒污染。因此，在进行动物实验前，需要对实验动物进行严格的检疫和筛查。
5. 环境污染：实验室所处的环境也可能成为质粒污染的来源。例如，空气中的微生物、实验室内的灰尘等都可能携带有质粒DNA，从而污染实验样品。
6. 人为因素：实验人员的操作失误、疏忽等也是导致质粒污染的原因之一。例如，在提取、纯化质粒的过程中，如果操作人员没有按照规定的程序进行操作，可能会导致质粒污染。
为了避免质粒污染，实验室需要采取一系列措施，如加强实验室的无菌操作规程、严格筛选实验材料、定期对实验室进行清洁和消毒等。同时，实验人员也需要提高自己的操作技能和意识，确保实验过程的安全和准确性。
热心网友
时间：2024-08-12 18:18
1.菌的活性:如果菌种过久或保存不当，质粒拷贝数可能会很低，影响最终的浓度；
2.基因组DNA污染:在碱裂解时，如果溶液配制或体积不对，或剧烈震荡，会带入基因组dna；
3，蛋白污染:碱裂解后，需高速离心，如果时间或转速不够，蛋白没有完全沉降，或吸取上清时混入沉淀，会带来蛋白污染；
4，RNA污染:一般在溶液1中，要加入Rnase，如果酶活性不好，会有Rna污染；
5，乙醇没去除干净:在70%乙醇洗后，要再次离心去乙醇，如果忽视了这一步，残余的乙醇会极大的降低质粒产量；
6，洗脱buffer的选择:最好用TA等试剂盒自带的洗脱buffer洗脱质粒，如果用纯水，现在的纯水仪的纯水都偏酸，也会降低产量。
