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pcr产物第一次跑胶,有明显的一个条带。切胶回收后,将回收产物再次跑胶...

发布网友 发布时间:2024-02-17 01:00

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pcr产物第一次跑胶,有明显的一个条带。切胶回收后,将回收产物再次跑胶...

可能是pcr回收产物有杂带污染,跑pcr产物的时候没有分开,然后回收纯化以后,再跑就分开了。这个酶切之后跑电泳也是两条带。双酶切的话,没关系的,照样回收照样连,照样出结果。

小分子抑制剂有哪些?

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...电泳检测有一条带,然后将回收的DNA做模板再次PCR,引物和前面一样,却...

这是模板浓度过高,造成引物相对稀释引起的。将回收产物梯度稀释,再扩增即可。

PCR产物纯化时 用的是什么纯化,扩增完直接纯,还是要跑胶?

当然这种方法对PCR产物纯化后回收率是很低的,你需要多做几管PCR,然后一起纯化回收。所以你最好去买PCR产物纯化试剂盒,这个方法现在只是没有试剂盒的情况下应急的。如果是PCR产物跑胶后有两条以上的带,那么你就得切胶回收目的片段,推荐这个时候还是买切胶回收试剂盒,传统法不是没有,但现在用的...

PCR产物跑胶什么条带都没有是怎么回事

后来不断的调整Taq酶的浓度,当然是增加了,有了一点儿效果,但是,还是不理想,再调整(降低)底物(DNA)的浓度,还是不行,再调整(稀释到50倍),再做一次,有了,很是漂亮而又清晰的PCR产物的条带! 那一刻,真是太高兴了!紧接着,又做了一次,所有的样品都有PCR产物了。总结一下,就是DN...

琼脂糖凝胶回收后DNA位置变了的原因

pcr产物经琼脂糖凝胶电泳纯化回收后,纯化产物再次跑电泳,有时会出现电泳位置在marker上的变化。1.可能是marker的问题,有时候marker就是不太准。2.pcr产物在琼脂糖电泳时,看上去是单一的条带,有时候其实是混杂的条带,所有切胶回收再跑电泳,有时候会出现杂带。另外,由于pcr产物带较宽,纯化后的...

PCR产物是用胶回收试剂盒还是直接PCR产物纯化试剂盒

PCR凝胶试剂盒:是在PCR产物是混合物,有多条杂带的情况下,先跑胶将杂带分离,然后在将所要的条带位置的胶切下回收,后者的回收效率低,但是很纯净。胶回收试剂盒操作步骤:配制琼脂糖EB凝胶,电泳以分离DNA片段。任何类型或等级的琼脂糖都可以使用。电泳足够时间后,在紫外灯下小心地把所需的DNA的...

求助:胶回收:雀式pcr第一对pcr引物扩增后 ,产物电泳得到两条带,那么我...

一般是不要切胶,直接把第一次的PCR产物取一微升作为底物,再用第二队引物扩增一次,如果引物设计正确,就只会出现一条条带了。如果要计算大小,就按楼上说的。但是雀式pcr的目的就是至少做2次,以保证特异性。

我想把PCR产物做克隆,而我的条带是单一条带,应该说很纯,那我是切胶做...

切胶,因为PCR产物中还有酶,引物,引物二聚体等,它们在这里属于杂质,影响克隆的结果,尤其是引物二聚体。切胶回收处理可以除去这些杂质。

PCR后隔天胶回收会有影响吗

你是说隔天在跑胶回收吗?没什么影响的,但是要注意PCR产物必须放在冰箱中保存;如果是已经跑胶了的话,那必须马上回收,因为DNA在胶中时间长了会扩散的,到时你不好切胶,而且如果有其他条带的话可能会混一起,导致无法回收。

菌液PCR不同条带

原来扩增的时候就有两条带,回收的时候(是凝胶回收吗?)可能因为产物浓度过大,导致两条带没跑开,让你一起切下来了(回收后电泳检测了没?),所以连接后有两种克隆。至于说为什么会出现两种克隆,要具体问题具体分析咯。1 可能你的模板有DNA污染,所以同时扩出了DNA的带和cDNA的带;2 你的基因...

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