免疫荧光 定位
发布网友
发布时间:2023-05-17 07:25
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热心网友
时间:2023-05-24 07:25
你所说的方法是采用荧光素分子直接标记抗体,在免疫荧光中被称为直接法。
更多的做法不是采用直接法而是采用间接法,也就是用对应某一种抗原的抗体(这里被称为一抗)与细胞孵育结合,在采用对应一抗(也就是抗一抗)的抗体(这里被称为二抗,二抗上偶联有荧光素分子)与细胞孵育结合后在荧光显微镜下观察。
间接法较直接法能够有效降低背景荧光,提高信噪比,同时由于抗体的放大效应使得检测灵敏度大大提升。
我就在做这方面的研究工作,如果需要的话可以共同探讨。
举例:对细胞微管蛋白进行亚细胞定位,,用低聚甲醛固定细胞,NP-40穿孔,选择抗微管蛋白的抗体作为一抗,孵育后洗脱去背景,加入偶联荧光素的二抗孵育后洗脱去背景,,上荧光显微镜观察。
希望能够对你有所帮助。
热心网友
时间:2023-05-24 07:26
...你只是把原理答上来了,并没有举出实例。
可能能得5~7分吧。