怎样得到一种基因的cDNA,求具体步骤
发布网友
发布时间:2022-04-24 01:09
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热心网友
时间:2023-09-18 14:52
1.
首先,你要知道那种细胞有该基因的高表达。
2.
培养该细胞。
3.
提取总的mRNA。
4.
下面的步骤取决于你对该基因序列的知道情况。如果全序列已知,那就设计一对针对首尾的PCR引物,直接做RT-PCR,就可以得到全长cDNA了。如果只知道其中一段,那就先把mRNA用随机引物反转录为cDNA,建立cDNA文库。然后用已知的序列设计探针,在文库中寻找