il1β诱导的凋亡通路有哪些
发布网友
发布时间：2022-12-19 05:59
共1个回答
热心网友
时间：2023-09-20 07:02
其中，凋亡（细胞程序性死亡，PCD）则是细胞以优雅老死的方式来定格生命消逝时的最后瞬间。
具体而言，就是细胞凋亡时，胞内的各种凋亡相关分子齐聚大舞台，上演一出死亡协奏曲后，优雅地走向虚无。
而这个过程大致分为以下几个阶段：接受凋亡信号→凋亡*分子间的相互作用→调节蛋白水解酶的活性(Caspase)→进入连续反应过程。
而因启动阶段的不同，细胞凋亡往往又会兵分三路，即线粒体通路、内质网通路、死亡受体通路。
线粒体是凋亡的第一个据点。在这里，Bax家族与Bcl-2家族里应外合，改变线粒体膜的通透性，让跨膜电位丢失并释放细胞色素C(Cyt C)和其他蛋白，以诱导Caspase通路级联反应。
内质网通路，即由内质网失常引起，而非以细胞膜或线粒体为靶点的凋亡信号触发。这只队伍分了水陆两路，PERK通路和Caspase7通路。
死亡受体通路就是各种外界因素作为细胞凋亡的启动剂，然后通过不同的信号传递系统传递凋亡信号，引起细胞凋亡。
而为了更好将细胞生命的最后瞬间固定下来，研究者也是各出巧计，但常用的检测方法也不过六种：
01 利用“放大镜”
熟知凋亡细胞的你，可通过实验室里的“放大镜”——显微镜，对行来过往的细胞进行逐个排查。
只要细胞皱缩、变形、空泡化，抑或裂解为凋亡小体，都逃不过你的火眼金睛。
02 Annexin V/PI染色
Annexin V（Ca+依赖的磷脂结合蛋白）经常与搭档PI（碘化丙啶）染料共同捕获凋亡细胞，只要他俩一出手，总能将凋亡早晚期细胞和死细胞区分开来。
一般它们可将细胞分为以下四种类型（见下图）：
上图是一张典型的Annexin V-PI 双染色后的流式检测结果数据：
1）Annexin V阴性且PI阴性（双阴性细胞）：活细胞；
2）Annexin V阳性且PI阴性：早期凋亡的细胞；
3）Annexin V阳性且PI阳性（双阳性细胞）：晚期凋亡或者是坏死的细胞；
4）Annexin V阴性且PI阳性：可能是由于非特异性染色导致的。
03 攻占“线粒体”据点，为我所用
既然线粒体是细胞凋亡的一大推手，便让我们有了可趁之机。让亲脂性阳离子荧光染料如Rhodamine123、JC-1、TMRM，渗透到线粒体中，发出强烈荧光（一般正常细胞显红色，凋亡显绿色），来作为细胞是否凋亡的指路标。
又或者，借助试剂盒之力分离出线粒体出细胞中的线粒体和细胞质，再通过SDS-PAGE电泳对其进行分开审讯，最后用专门的抗体“锁链”——Cytochody将细胞色素C（Cytc）缉拿归案。
04 抓住Caspcase蛋白，让凋亡细胞即刻现形
Caspcase蛋白作为凋亡通路的骨干要员，它的出现，让细胞凋亡成为了一件板上钉钉的事情。
以Caspcase3为例，正常情况下以酶原（32kD）的形式存在于胞浆中。在凋亡早期被激活后，可裂解为两个大亚基（17kD）和两个小亚基（12kD），而在细胞凋亡的晚期和死亡细胞，caspase-3的活性明显下降。
当然，除了Caspcase蛋白，也可以通过凋亡其他核心通路中的骨干成员来判断（见下图）。两者相结合，细胞凋亡检测结果的准确性才能得以保证。
05 来自DNA的提示
DNA作为细胞内曾经的王者，在面临细胞全面崩溃时不仅无力回天，甚至于它本身都断裂成一段一段的。
那么细胞是否凋亡，只需要让断裂DNA从小到大排排站就可以判断了：凋亡时DNA在核小体间有规律的断裂并会产生180-200bpDN*段；而坏死细胞的DNA则会断裂为无特征的杂乱片段。
06 Tunel检测法
细胞凋亡时DNA双链或单链断裂会产生大量的粘性3’-OH末端。以此为线索，在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）协助下，可将生物素/荧光素标记的dUTP绑定在3’-OH末端，并通过酶联显色或荧光检测来定量分析结果。
本文首发于“ 酸谈”微信公众号
转载请注明：解螺旋·临床医生科研成长平台。
点击下面的链接可扫码添加我的助理微信，私信不回问题：
解螺旋-酸菜老师
传播科研最前沿知识；
中国临床医生科研成长平台；
现在添加还可领取10G科研资源大礼包！（内含：SCI写作投稿技巧、数据库使用教程、国自然工具包……）
SCI从来不简单，否则不会难住那么多人。但是有方法比没有方法自己领悟快无数倍。
我和我的伙伴们，从17年就开始帮助医学生医生解决SCI困惑，积累了很多经验，下面的学习体验营，是我的36策体验内容，医学生医生小白也能入门，相信你也可以完成蜕变。
解螺旋-临床医生科研成长平台
发布于 2 年前著作权归作者所有
赞同 541
