毛细管电泳检测大小怎么看
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发布时间:2022-12-20 04:12
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热心网友
时间:2023-09-24 11:06
毛细管电泳色谱仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,毛细管是分离的关键。毛细管技术指标包括材质、内径、外径、壁厚和长度等。
一、材质:
理想的毛细管必须是化学和电惰性,能透过紫外和可见光,有一定的韧性,富有弹性,易于弯曲,耐用而且便宜。
目前使用的材质有聚四氟乙烯、玻璃和石英等,其中石英最常用。熔融石英拉制的毛细管脆而易断,外涂聚酰亚胺后会变得很有弹性。
1、聚四氟乙烯:可透紫外光,电渗很弱。但毛细管内径不均匀,对样品有吸附,热传导差等。
2、玻璃:电渗zui强,但杂质含量较高。
3、石英:有天然和人造两类,基本成分是二氧化硅。
二、内径:
石英毛细管内径通常为25~75μm,多采用50μm和75μm,毛细管电泳色谱有时用内径更大的毛细管。
1、小内径毛细管优点:
(1)电流小,焦耳热少,允许施加较高电压。
(2)散热面积大,能加快散热,减小径向扩散,保持电渗流型为扁平型,提高柱效。
2、小内径毛细管缺点:
(1)比表面积大,会增加溶质的吸附作用。
(2)进样、检测和清洗困难。
(3)检测下限比大内径毛细管高。
三、外径:
毛细管外径为350~400μm。
通常有两种规格,厚壁毛细管外径为375μm,薄壁毛细管外径为150μm。
四、壁厚:
毛细管壁厚包括石英本身壁厚和聚酰亚胺涂层厚度(热导率很低)两部分。
石英本身壁厚为150~375μm。
聚酰亚胺涂层厚度为12μm。
五、长度:
毛细管长度称为总长度。根据分离度要求可选用20~100cm长度。
毛细管入口端至检测器窗口的距离称为有效长度。有效长度为80~100cm。
电场强度恒定时,理论塔板数与柱长成正比。但柱长不能无限增加,因为要使电场强度恒定,柱两端须增加电压。
电压恒定时,柱长增加,可减少焦耳热。但会降低电场强度,增加分析时间。
热心网友
时间:2023-09-24 11:06
毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,它使分析化学得以从微升水平进入纳升水平,并使单细胞分析,乃至单分子分析成为可能。长期困扰我们的生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的转机